中国农业大学学报
中國農業大學學報
중국농업대학학보
JOURNAL OF CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2006年
1期
53-56
,共4页
刘洋%何心尧%马红波%吴泳历%杨佑明
劉洋%何心堯%馬紅波%吳泳歷%楊祐明
류양%하심요%마홍파%오영력%양우명
棉花%RNA提取%CTAB-PVP
棉花%RNA提取%CTAB-PVP
면화%RNA제취%CTAB-PVP
针对棉花组织总RNA难以提取、不同组织的提取方法难以统一的问题,借鉴Jaakda等的越橘果实总RNA提取方法(即CTAB-PVP法),对棉花组织总RNA的提取效果进行了分析.实验结果表明:得到的棉花纤维、胚珠、叶片、胚根、花瓣、下胚轴和花药各组织的RNA完整性好,其D260/D280比值为1.7~2.0,产率30~180 μg/g(鲜质量);用开花后15 d纤维的RNA为材料进行反转录,再利用RT-PCR和3'RACE技术进行克隆,各获得1个大小为542和712 bp的cDNA克隆,经序列分析鉴定,这2个片段分别编码棉花微管结合蛋白和微丝结合蛋白.
針對棉花組織總RNA難以提取、不同組織的提取方法難以統一的問題,藉鑒Jaakda等的越橘果實總RNA提取方法(即CTAB-PVP法),對棉花組織總RNA的提取效果進行瞭分析.實驗結果錶明:得到的棉花纖維、胚珠、葉片、胚根、花瓣、下胚軸和花藥各組織的RNA完整性好,其D260/D280比值為1.7~2.0,產率30~180 μg/g(鮮質量);用開花後15 d纖維的RNA為材料進行反轉錄,再利用RT-PCR和3'RACE技術進行剋隆,各穫得1箇大小為542和712 bp的cDNA剋隆,經序列分析鑒定,這2箇片段分彆編碼棉花微管結閤蛋白和微絲結閤蛋白.
침대면화조직총RNA난이제취、불동조직적제취방법난이통일적문제,차감Jaakda등적월귤과실총RNA제취방법(즉CTAB-PVP법),대면화조직총RNA적제취효과진행료분석.실험결과표명:득도적면화섬유、배주、협편、배근、화판、하배축화화약각조직적RNA완정성호,기D260/D280비치위1.7~2.0,산솔30~180 μg/g(선질량);용개화후15 d섬유적RNA위재료진행반전록,재이용RT-PCR화3'RACE기술진행극륭,각획득1개대소위542화712 bp적cDNA극륭,경서렬분석감정,저2개편단분별편마면화미관결합단백화미사결합단백.