山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
10期
21-23
,共3页
颜守义%万光俊%王波%赵文新
顏守義%萬光俊%王波%趙文新
안수의%만광준%왕파%조문신
甲状腺肿瘤%小干扰RNA%细胞外基质金属蛋白酶诱导因子%血管内皮生长因子C%淋巴转移
甲狀腺腫瘤%小榦擾RNA%細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子%血管內皮生長因子C%淋巴轉移
갑상선종류%소간우RNA%세포외기질금속단백매유도인자%혈관내피생장인자C%림파전이
目的 观察CD147基因沉默对甲状腺乳头状癌细胞株K1中血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的影响,筛选有效的小干扰RNA(siRNA)序列.方法 设计合成3对不同的CD147 siRNA,分别转染人K1为实验组(S1、S2、S3组),同时设不加干预者为正常组,siRNA阴性对照进行干预为阴性对照组.RT-PCR、ELISA法分别测定各组CD147 mRNA及其蛋白.筛选能有效沉默CD147 mRNA及其蛋白的siRNA序列.RT-PCR、Western blot法分别测定CD147表达沉默后K1细胞中的VEGF-C mRNA及其蛋白.结果 S1组CD147 mRNA及其蛋白表达量与正常组、阴性对照组相比,P均>0.05.S2、S3组与正常组、阴性对照组相比,P均<0.05.S2、S3组的siRNA序列可有效沉默CD147的表达而S1组不能.S2、S3组CD147 mRNA的表达抑制率分别为67.8%和72.5%;CD147蛋白表达抑制率为31.7%和35.4%.S2、S3组K1细胞中VEGF-C mRNA表达抑制率分别为66.4%和56.6%;其蛋白表达抑制率分别为51.9%和41.6%.结论 筛选出了能有效沉默CD147基因表达的siRNA序列.CD147 基因沉默后可降低K1细胞中VEGF-C的表达,可能影响肿瘤细胞的淋巴结转移能力.
目的 觀察CD147基因沉默對甲狀腺乳頭狀癌細胞株K1中血管內皮生長因子C(VEGF-C)錶達的影響,篩選有效的小榦擾RNA(siRNA)序列.方法 設計閤成3對不同的CD147 siRNA,分彆轉染人K1為實驗組(S1、S2、S3組),同時設不加榦預者為正常組,siRNA陰性對照進行榦預為陰性對照組.RT-PCR、ELISA法分彆測定各組CD147 mRNA及其蛋白.篩選能有效沉默CD147 mRNA及其蛋白的siRNA序列.RT-PCR、Western blot法分彆測定CD147錶達沉默後K1細胞中的VEGF-C mRNA及其蛋白.結果 S1組CD147 mRNA及其蛋白錶達量與正常組、陰性對照組相比,P均>0.05.S2、S3組與正常組、陰性對照組相比,P均<0.05.S2、S3組的siRNA序列可有效沉默CD147的錶達而S1組不能.S2、S3組CD147 mRNA的錶達抑製率分彆為67.8%和72.5%;CD147蛋白錶達抑製率為31.7%和35.4%.S2、S3組K1細胞中VEGF-C mRNA錶達抑製率分彆為66.4%和56.6%;其蛋白錶達抑製率分彆為51.9%和41.6%.結論 篩選齣瞭能有效沉默CD147基因錶達的siRNA序列.CD147 基因沉默後可降低K1細胞中VEGF-C的錶達,可能影響腫瘤細胞的淋巴結轉移能力.
목적 관찰CD147기인침묵대갑상선유두상암세포주K1중혈관내피생장인자C(VEGF-C)표체적영향,사선유효적소간우RNA(siRNA)서렬.방법 설계합성3대불동적CD147 siRNA,분별전염인K1위실험조(S1、S2、S3조),동시설불가간예자위정상조,siRNA음성대조진행간예위음성대조조.RT-PCR、ELISA법분별측정각조CD147 mRNA급기단백.사선능유효침묵CD147 mRNA급기단백적siRNA서렬.RT-PCR、Western blot법분별측정CD147표체침묵후K1세포중적VEGF-C mRNA급기단백.결과 S1조CD147 mRNA급기단백표체량여정상조、음성대조조상비,P균>0.05.S2、S3조여정상조、음성대조조상비,P균<0.05.S2、S3조적siRNA서렬가유효침묵CD147적표체이S1조불능.S2、S3조CD147 mRNA적표체억제솔분별위67.8%화72.5%;CD147단백표체억제솔위31.7%화35.4%.S2、S3조K1세포중VEGF-C mRNA표체억제솔분별위66.4%화56.6%;기단백표체억제솔분별위51.9%화41.6%.결론 사선출료능유효침묵CD147기인표체적siRNA서렬.CD147 기인침묵후가강저K1세포중VEGF-C적표체,가능영향종류세포적림파결전이능력.