CAJ | 학술논문

目的研究噪声对豚鼠耳蜗血管纹紧密连接蛋白claudin-5表达及血迷路屏障功能的影响.方法 40只豚鼠随机分为正常对照组(20只)和噪声暴露组(20只),噪声暴露组给予声强为115 dB SPL白噪声暴露,每天6小时,连续两天,对照组不予噪声暴露.于实验前及噪声暴露后次日对两组豚鼠行ABR检测,第二次ABR检测后对两组豚鼠耳蜗基底膜行鬼笔环肽-异硫氰酸荧光素(Phalloidin-FITC)染色;用硝酸镧透射电镜和常规透射电镜观察两组豚鼠内耳血迷路屏障通透性和紧密连接的变化;Western blot和免疫组织化学染色观察两组豚鼠耳蜗血管纹和螺旋韧带处claudin-5的表达.结果噪声暴露组豚鼠ABR波Ⅲ反应阈较正常对照组阈移40 dB以上,差异有统计学意义(P<0.05); 基底膜铺片FITC染色示噪声暴露组底回基底膜毛细胞大量缺失,其余部分毛细胞纤毛排列紊乱并出现融合,而对照组毛细胞排列整齐,其纤毛呈V或W型,两组间外毛细胞计数比较差异有统计学意义(P<0.05);透射电镜下,可见噪声暴露组血管内皮细胞间和边缘细胞间的紧密连接均遭到破坏,细胞间隙增大;硝酸镧透射电镜下,大量镧颗粒从血管腔内渗漏到管腔外的组织间隙,而对照组镧颗粒仅局限于血管腔内;Western blot结果示,两组耳蜗外侧壁血管纹均有claudin-5表达,但噪声暴露组的表达量明显低于正常组;免疫组织化学染色也表明,两组豚鼠耳蜗外侧壁毛细血管内皮细胞、边缘细胞等处均有claudin-5阳性表达,但噪声组表达量显著低于正常组(P<0.05).结论噪声通过下调紧密连接蛋白claudin-5的表达,破坏细胞间紧密连接,增加豚鼠血迷路屏障的通透性,从而导致内耳微环境的破坏,是噪声性聋可能的发病机制之一.
목적 연구조성대돈서이와혈관문긴밀련접단백claudin-5표체급혈미로병장공능적영향.방법 40지돈서수궤분위정상대조조(20지)화조성폭로조(20지),조성폭로조급여성강위115 dB SPL백조성폭로,매천6소시,련속량천,대조조불여조성폭로.우실험전급조성폭로후차일대량조돈서행ABR검측,제이차ABR검측후대량조돈서이와기저막행귀필배태-이류청산형광소(Phalloidin-FITC)염색;용초산란투사전경화상규투사전경관찰량조돈서내이혈미로병장통투성화긴밀련접적변화;Western blot화면역조직화학염색관찰량조돈서이와혈관문화라선인대처claudin-5적표체.결과 조성폭로조돈서ABR파Ⅲ반응역교정상대조조역이40 dB이상,차이유통계학의의(P<0.05); 기저막포편FITC염색시조성폭로조저회기저막모세포대량결실,기여부분모세포섬모배렬문란병출현융합,이대조조모세포배렬정제,기섬모정V혹W형,량조간외모세포계수비교차이유통계학의의(P<0.05);투사전경하,가견조성폭로조혈관내피세포간화변연세포간적긴밀련접균조도파배,세포간극증대;초산란투사전경하,대량란과립종혈관강내삼루도관강외적조직간극,이대조조란과립부국한우혈관강내;Western blot결과시,량조이와외측벽혈관문균유claudin-5표체,단조성폭로조적표체량명현저우정상조;면역조직화학염색야표명,량조돈서이와외측벽모세혈관내피세포、변연세포등처균유claudin-5양성표체,단조성조표체량현저저우정상조(P<0.05).결론 조성통과하조긴밀련접단백claudin-5적표체,파배세포간긴밀련접,증가돈서혈미로병장적통투성,종이도치내이미배경적파배,시조성성롱가능적발병궤제지일.