微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2008年
11期
1451-1458
,共8页
何湘%刘大伟%孙忠科%王芳%姜铮%赵红庆%陈宣男%黄留玉%袁静
何湘%劉大偉%孫忠科%王芳%薑錚%趙紅慶%陳宣男%黃留玉%袁靜
하상%류대위%손충과%왕방%강쟁%조홍경%진선남%황류옥%원정
比较蛋白质组%乳糖代谢%双向电泳%Pro-QDiamond染色%MALDI-TOF%磷酸化蛋白
比較蛋白質組%乳糖代謝%雙嚮電泳%Pro-QDiamond染色%MALDI-TOF%燐痠化蛋白
비교단백질조%유당대사%쌍향전영%Pro-QDiamond염색%MALDI-TOF%린산화단백
[目的]以本实验室前期构建的长双歧杆菌NCC2705菌株蛋白质参考图谱为基础,研究长双歧杆菌发酵乳糖和葡萄糖的比较蛋白质组学.[方法]采用ImageMaster 2D Elite Platnum Version 5.0比较分析3倍以上蛋白差异点;利用MALDI-TOF进行差异蛋白鉴定,每个蛋白质点的肽指纹图谱在长双歧杆菌NCC2705菌株的蛋白质数据库用Mascot进行检索;采用Pro-Q磷酸化试剂进行磷酸化蛋白的染色.[结果]鉴定到31个蛋白表达发生显著变化,在乳糖发酵中14个蛋白上调17个蛋白下调.这些蛋白为亲水性酸性蛋白,它们基因的CAI值均在0.5以上,主要包括糖代谢相关蛋白、应激蛋白、转录和翻译相关蛋白,还有一些未知功能的蛋白.此外,有两个蛋白:转醛缩酶(BL0715,transaldolase,tal)L3蛋白点和丙酮酸激酶(BL0988,pyruvate kinase,pyk)G9蛋白点发生了磷酸化作用.[结论]长双歧杆菌NCC2705在乳糖中生长快于葡萄糖,它们的降解途径是相同的;转醛缩酶和丙酮酸激酶发生了翻译后修饰作用,推测转醛缩酶在43T和47S发生了磷酸化,而丙酮酸激酶在65S发生了磷酸化.
[目的]以本實驗室前期構建的長雙歧桿菌NCC2705菌株蛋白質參攷圖譜為基礎,研究長雙歧桿菌髮酵乳糖和葡萄糖的比較蛋白質組學.[方法]採用ImageMaster 2D Elite Platnum Version 5.0比較分析3倍以上蛋白差異點;利用MALDI-TOF進行差異蛋白鑒定,每箇蛋白質點的肽指紋圖譜在長雙歧桿菌NCC2705菌株的蛋白質數據庫用Mascot進行檢索;採用Pro-Q燐痠化試劑進行燐痠化蛋白的染色.[結果]鑒定到31箇蛋白錶達髮生顯著變化,在乳糖髮酵中14箇蛋白上調17箇蛋白下調.這些蛋白為親水性痠性蛋白,它們基因的CAI值均在0.5以上,主要包括糖代謝相關蛋白、應激蛋白、轉錄和翻譯相關蛋白,還有一些未知功能的蛋白.此外,有兩箇蛋白:轉醛縮酶(BL0715,transaldolase,tal)L3蛋白點和丙酮痠激酶(BL0988,pyruvate kinase,pyk)G9蛋白點髮生瞭燐痠化作用.[結論]長雙歧桿菌NCC2705在乳糖中生長快于葡萄糖,它們的降解途徑是相同的;轉醛縮酶和丙酮痠激酶髮生瞭翻譯後脩飾作用,推測轉醛縮酶在43T和47S髮生瞭燐痠化,而丙酮痠激酶在65S髮生瞭燐痠化.
[목적]이본실험실전기구건적장쌍기간균NCC2705균주단백질삼고도보위기출,연구장쌍기간균발효유당화포도당적비교단백질조학.[방법]채용ImageMaster 2D Elite Platnum Version 5.0비교분석3배이상단백차이점;이용MALDI-TOF진행차이단백감정,매개단백질점적태지문도보재장쌍기간균NCC2705균주적단백질수거고용Mascot진행검색;채용Pro-Q린산화시제진행린산화단백적염색.[결과]감정도31개단백표체발생현저변화,재유당발효중14개단백상조17개단백하조.저사단백위친수성산성단백,타문기인적CAI치균재0.5이상,주요포괄당대사상관단백、응격단백、전록화번역상관단백,환유일사미지공능적단백.차외,유량개단백:전철축매(BL0715,transaldolase,tal)L3단백점화병동산격매(BL0988,pyruvate kinase,pyk)G9단백점발생료린산화작용.[결론]장쌍기간균NCC2705재유당중생장쾌우포도당,타문적강해도경시상동적;전철축매화병동산격매발생료번역후수식작용,추측전철축매재43T화47S발생료린산화,이병동산격매재65S발생료린산화.
