中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2006年
6期
454-459
,共6页
李新鸣%孙黎光%刘萍%白抚生%付玥%宣忠信
李新鳴%孫黎光%劉萍%白撫生%付玥%宣忠信
리신명%손려광%류평%백무생%부모%선충신
web2基因%rad53基因%S期检查点%酿酒酵母
web2基因%rad53基因%S期檢查點%釀酒酵母
web2기인%rad53기인%S기검사점%양주효모
为探讨酿酒酵母(S.cerevisiae)S期检查点通路上,web2(wants E1A badly2,web2)基因与rad53基因的上下游位置及相互作用关系,利用羟基脲(hvdroxyurea,HU)分别阻断web2突变株和野生株细胞的DNA合成.采用pHA-rad53质粒救助实验测定质粒源性Rad53蛋白是否能救助web2突变株对羟基脲的敏感性;Western印迹及免疫共沉淀反应检测Rad53蛋白表达及磷酸化.结果显示,pHA-rad53质粒可以救助web2突变株的存活;Western印迹检测到web2突变株内质粒源性Rad53蛋白表达增强而且至少Rad53部分蛋白为磷酸化蛋白.说明在HU作用下,过表达并磷酸化的质粒源性Rad53蛋白可以救助web2突变株的S期检查点功能缺陷,在酿酒酵母S期检查点通路上web2基因位于rad53基因上游,可能直接参与将检查点信号传递至Rad53蛋白.
為探討釀酒酵母(S.cerevisiae)S期檢查點通路上,web2(wants E1A badly2,web2)基因與rad53基因的上下遊位置及相互作用關繫,利用羥基脲(hvdroxyurea,HU)分彆阻斷web2突變株和野生株細胞的DNA閤成.採用pHA-rad53質粒救助實驗測定質粒源性Rad53蛋白是否能救助web2突變株對羥基脲的敏感性;Western印跡及免疫共沉澱反應檢測Rad53蛋白錶達及燐痠化.結果顯示,pHA-rad53質粒可以救助web2突變株的存活;Western印跡檢測到web2突變株內質粒源性Rad53蛋白錶達增彊而且至少Rad53部分蛋白為燐痠化蛋白.說明在HU作用下,過錶達併燐痠化的質粒源性Rad53蛋白可以救助web2突變株的S期檢查點功能缺陷,在釀酒酵母S期檢查點通路上web2基因位于rad53基因上遊,可能直接參與將檢查點信號傳遞至Rad53蛋白.
위탐토양주효모(S.cerevisiae)S기검사점통로상,web2(wants E1A badly2,web2)기인여rad53기인적상하유위치급상호작용관계,이용간기뇨(hvdroxyurea,HU)분별조단web2돌변주화야생주세포적DNA합성.채용pHA-rad53질립구조실험측정질립원성Rad53단백시부능구조web2돌변주대간기뇨적민감성;Western인적급면역공침정반응검측Rad53단백표체급린산화.결과현시,pHA-rad53질립가이구조web2돌변주적존활;Western인적검측도web2돌변주내질립원성Rad53단백표체증강이차지소Rad53부분단백위린산화단백.설명재HU작용하,과표체병린산화적질립원성Rad53단백가이구조web2돌변주적S기검사점공능결함,재양주효모S기검사점통로상web2기인위우rad53기인상유,가능직접삼여장검사점신호전체지Rad53단백.
