医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2007年
1期
15-19,后插4
,共6页
褚晓源%王杰军%陈龙邦%王靖华%管晓翔%耿怀成%张群%宋海珠
褚曉源%王傑軍%陳龍邦%王靖華%管曉翔%耿懷成%張群%宋海珠
저효원%왕걸군%진룡방%왕정화%관효상%경부성%장군%송해주
白细胞介素-12%基因治疗%树突细胞%细胞毒性T淋巴细胞
白細胞介素-12%基因治療%樹突細胞%細胞毒性T淋巴細胞
백세포개소-12%기인치료%수돌세포%세포독성T림파세포
目的:研究小鼠结肠癌细胞CT-26 RNA体外转染mIL-12基因修饰的树突细胞(DC),观察其诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)能力. 方法:小鼠骨髓细胞体外经rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养获取DC,流式细胞仪检测其纯度;293细胞扩增携带mIL-12基因的重组腺病毒,体外转染DC;Trizol法提取CT-26细胞总RNA,应用TransMessenger体外转染mIL-12基因修饰的DC;ELISA法检测细胞上清及小鼠血液中mIL-12,LDH释放法检测小鼠体内特异性CTL活性. 结果:小鼠骨髓细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的DC,流式细胞仪检测CD11c+的DC＞90%;携带mIL-12基因重组腺病毒转染的DC细胞高表达mIL-12;CT-26细胞总RNA体外转染mIL-12基因修饰的DC后,回输小鼠,能明显提高小鼠体内mIL-12的水平,并可诱导体内生成较高水平的CTL活性,而以该RNA转染Ad-LacZ修饰DC后的对照组及RNA转染DC的对照组,可诱导机体生成中等水平的特异性CTL活性,DC、PBS对照组则均无此作用. 结论:小鼠肠癌CT-26细胞总RNA转染mIL-12基因修饰的DC后,免疫接种小鼠,可提高小鼠体内mIL-12的水平,并能有效诱导机体产生较高水平的特异性CTL活性.
目的:研究小鼠結腸癌細胞CT-26 RNA體外轉染mIL-12基因脩飾的樹突細胞(DC),觀察其誘導特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)能力. 方法:小鼠骨髓細胞體外經rmGM-CSF、rmIL-4誘導培養穫取DC,流式細胞儀檢測其純度;293細胞擴增攜帶mIL-12基因的重組腺病毒,體外轉染DC;Trizol法提取CT-26細胞總RNA,應用TransMessenger體外轉染mIL-12基因脩飾的DC;ELISA法檢測細胞上清及小鼠血液中mIL-12,LDH釋放法檢測小鼠體內特異性CTL活性. 結果:小鼠骨髓細胞經誘導培養後,穫得大量高純度的DC,流式細胞儀檢測CD11c+的DC＞90%;攜帶mIL-12基因重組腺病毒轉染的DC細胞高錶達mIL-12;CT-26細胞總RNA體外轉染mIL-12基因脩飾的DC後,迴輸小鼠,能明顯提高小鼠體內mIL-12的水平,併可誘導體內生成較高水平的CTL活性,而以該RNA轉染Ad-LacZ脩飾DC後的對照組及RNA轉染DC的對照組,可誘導機體生成中等水平的特異性CTL活性,DC、PBS對照組則均無此作用. 結論:小鼠腸癌CT-26細胞總RNA轉染mIL-12基因脩飾的DC後,免疫接種小鼠,可提高小鼠體內mIL-12的水平,併能有效誘導機體產生較高水平的特異性CTL活性.
목적:연구소서결장암세포CT-26 RNA체외전염mIL-12기인수식적수돌세포(DC),관찰기유도특이성세포독성T림파세포(CTL)능력. 방법:소서골수세포체외경rmGM-CSF、rmIL-4유도배양획취DC,류식세포의검측기순도;293세포확증휴대mIL-12기인적중조선병독,체외전염DC;Trizol법제취CT-26세포총RNA,응용TransMessenger체외전염mIL-12기인수식적DC;ELISA법검측세포상청급소서혈액중mIL-12,LDH석방법검측소서체내특이성CTL활성. 결과:소서골수세포경유도배양후,획득대량고순도적DC,류식세포의검측CD11c+적DC＞90%;휴대mIL-12기인중조선병독전염적DC세포고표체mIL-12;CT-26세포총RNA체외전염mIL-12기인수식적DC후,회수소서,능명현제고소서체내mIL-12적수평,병가유도체내생성교고수평적CTL활성,이이해RNA전염Ad-LacZ수식DC후적대조조급RNA전염DC적대조조,가유도궤체생성중등수평적특이성CTL활성,DC、PBS대조조칙균무차작용. 결론:소서장암CT-26세포총RNA전염mIL-12기인수식적DC후,면역접충소서,가제고소서체내mIL-12적수평,병능유효유도궤체산생교고수평적특이성CTL활성.
