病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2007年
2期
130-136
,共7页
江云波%肖少波%方六荣%潘永飞%罗锐%陈焕春
江雲波%肖少波%方六榮%潘永飛%囉銳%陳煥春
강운파%초소파%방륙영%반영비%라예%진환춘
猪繁殖与呼吸综合征病毒%ORF5m%ORF6%双基因共表达%DNA疫苗
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%ORF5m%ORF6%雙基因共錶達%DNA疫苗
저번식여호흡종합정병독%ORF5m%ORF6%쌍기인공표체%DNA역묘
为了增强猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗免疫效力,分别以PRRSV ORF5m(修饰型ORF5基因)及ORF6为候选基因,构建了单基因或双基因共表达的真核表达质粒pCI ORF5m、pCI-ORF6及pCI-ORF5m/ORF6.转染BHK-21细胞,Western blot检测证实ORF5m和ORF6基因均获得正确表达,并且共表达的GP5m和M蛋白能够形成异源二聚体.将构建的表达质粒免疫小鼠,首免后6周共表达ORF5m和ORF6基因的pCIORF5m/ORF6免疫组小鼠血清中和抗体全部阳转,8周时最高可达到1:32,同时还可检测到较高的特异性细胞免疫应答,明显高于单独表达ORF5m基因的pCI-ORF5m免疫组.进一步将DNA疫苗免疫断奶仔猪,pCI-ORF5m/ORF6免疫组同样能诱发优于pCI-ORF5m免疫组的中和抗体和细胞免疫反应.上述研究结果表明采用ORF5m和ORF6双基因共表达策略能够显著提高PRRSV DNA疫苗效力,为PRRSV新型疫苗的研制提供了有用的数据.
為瞭增彊豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)DNA疫苗免疫效力,分彆以PRRSV ORF5m(脩飾型ORF5基因)及ORF6為候選基因,構建瞭單基因或雙基因共錶達的真覈錶達質粒pCI ORF5m、pCI-ORF6及pCI-ORF5m/ORF6.轉染BHK-21細胞,Western blot檢測證實ORF5m和ORF6基因均穫得正確錶達,併且共錶達的GP5m和M蛋白能夠形成異源二聚體.將構建的錶達質粒免疫小鼠,首免後6週共錶達ORF5m和ORF6基因的pCIORF5m/ORF6免疫組小鼠血清中和抗體全部暘轉,8週時最高可達到1:32,同時還可檢測到較高的特異性細胞免疫應答,明顯高于單獨錶達ORF5m基因的pCI-ORF5m免疫組.進一步將DNA疫苗免疫斷奶仔豬,pCI-ORF5m/ORF6免疫組同樣能誘髮優于pCI-ORF5m免疫組的中和抗體和細胞免疫反應.上述研究結果錶明採用ORF5m和ORF6雙基因共錶達策略能夠顯著提高PRRSV DNA疫苗效力,為PRRSV新型疫苗的研製提供瞭有用的數據.
위료증강저번식여호흡종합정병독(PRRSV)DNA역묘면역효력,분별이PRRSV ORF5m(수식형ORF5기인)급ORF6위후선기인,구건료단기인혹쌍기인공표체적진핵표체질립pCI ORF5m、pCI-ORF6급pCI-ORF5m/ORF6.전염BHK-21세포,Western blot검측증실ORF5m화ORF6기인균획득정학표체,병차공표체적GP5m화M단백능구형성이원이취체.장구건적표체질립면역소서,수면후6주공표체ORF5m화ORF6기인적pCIORF5m/ORF6면역조소서혈청중화항체전부양전,8주시최고가체도1:32,동시환가검측도교고적특이성세포면역응답,명현고우단독표체ORF5m기인적pCI-ORF5m면역조.진일보장DNA역묘면역단내자저,pCI-ORF5m/ORF6면역조동양능유발우우pCI-ORF5m면역조적중화항체화세포면역반응.상술연구결과표명채용ORF5m화ORF6쌍기인공표체책략능구현저제고PRRSV DNA역묘효력,위PRRSV신형역묘적연제제공료유용적수거.
