海洋与湖沼
海洋與湖沼
해양여호소
OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA
2007年
2期
146-150
,共5页
PCR%假阴性%白斑综合征病毒
PCR%假陰性%白斑綜閤徵病毒
PCR%가음성%백반종합정병독
采用PCR、核酸探针斑点杂交、组织切片等方法研究了PCR检测白斑综合征病毒(WSSV)中的假阴性问题.设计了一对引物用于PCR检测WSSV,PCR扩增的产物长度为235bp,检出极限为0.1pg WSSV DNA.结果表明,PCR检测15例攻毒螯虾鳃样品时出现一例阴性,而经10-106倍稀释后的样品却呈现阳性,推断PCR出现了假阴性.核酸探针斑点杂交及组织切片结果表明注射WSSV的螯虾鳃组织确已被严重感染,进一步证实了PCR假阴性.根据PCR的检出极限及模板稀释梯度,推算出该PCR能成功扩增的引物与模板浓度的比例范围约为2.4×105-2.4×1010.
採用PCR、覈痠探針斑點雜交、組織切片等方法研究瞭PCR檢測白斑綜閤徵病毒(WSSV)中的假陰性問題.設計瞭一對引物用于PCR檢測WSSV,PCR擴增的產物長度為235bp,檢齣極限為0.1pg WSSV DNA.結果錶明,PCR檢測15例攻毒螯蝦鰓樣品時齣現一例陰性,而經10-106倍稀釋後的樣品卻呈現暘性,推斷PCR齣現瞭假陰性.覈痠探針斑點雜交及組織切片結果錶明註射WSSV的螯蝦鰓組織確已被嚴重感染,進一步證實瞭PCR假陰性.根據PCR的檢齣極限及模闆稀釋梯度,推算齣該PCR能成功擴增的引物與模闆濃度的比例範圍約為2.4×105-2.4×1010.
채용PCR、핵산탐침반점잡교、조직절편등방법연구료PCR검측백반종합정병독(WSSV)중적가음성문제.설계료일대인물용우PCR검측WSSV,PCR확증적산물장도위235bp,검출겁한위0.1pg WSSV DNA.결과표명,PCR검측15례공독오하새양품시출현일례음성,이경10-106배희석후적양품각정현양성,추단PCR출현료가음성.핵산탐침반점잡교급조직절편결과표명주사WSSV적오하새조직학이피엄중감염,진일보증실료PCR가음성.근거PCR적검출겁한급모판희석제도,추산출해PCR능성공확증적인물여모판농도적비례범위약위2.4×105-2.4×1010.
