遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2008年
8期
1043-1050
,共8页
任洪林%徐丹丹%乔琨%蔡灵%黄伟滨%张鼐%王克坚
任洪林%徐丹丹%喬琨%蔡靈%黃偉濱%張鼐%王剋堅
임홍림%서단단%교곤%채령%황위빈%장내%왕극견
杂色鲍%血淋巴细胞%细菌%抑制性差减杂交%巨噬细胞表达蛋白%类穿孔素%差异表达分析
雜色鮑%血淋巴細胞%細菌%抑製性差減雜交%巨噬細胞錶達蛋白%類穿孔素%差異錶達分析
잡색포%혈림파세포%세균%억제성차감잡교%거서세포표체단백%류천공소%차이표체분석
以雌性杂色鲍为对象,以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌,利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSH cDNA文库.随机挑取生长菌落110个克隆子,进行菌液PCR鉴定,计算文库重组率为98.18%,文库容量为1.37 × 106pfu.将重组子测序,经BLAST一致性搜索比对分析,有一重组片段含有穿孔素(Perforin)保守结构域,为巨噬细胞表达蛋白(MEP)类穿孔素部分cDNA序列,片段大小为1 551 bp,连续编码517个氨基酸残基,申请GenBank登录号为EU272049.经半定量PCR和荧光定量PCR差异显示分析,发现在细菌感染状态下MEP基因在血淋巴细胞中存在明显的上调表达现象.
以雌性雜色鮑為對象,以大腸桿菌、副溶血弧菌、溶壁微毬菌、錶皮葡萄毬菌、金黃色葡萄毬菌的混懸液做為攻毒菌,利用抑製性差減雜交(SSH)技術構建細菌攻毒的雜色鮑血淋巴細胞SSH cDNA文庫.隨機挑取生長菌落110箇剋隆子,進行菌液PCR鑒定,計算文庫重組率為98.18%,文庫容量為1.37 × 106pfu.將重組子測序,經BLAST一緻性搜索比對分析,有一重組片段含有穿孔素(Perforin)保守結構域,為巨噬細胞錶達蛋白(MEP)類穿孔素部分cDNA序列,片段大小為1 551 bp,連續編碼517箇氨基痠殘基,申請GenBank登錄號為EU272049.經半定量PCR和熒光定量PCR差異顯示分析,髮現在細菌感染狀態下MEP基因在血淋巴細胞中存在明顯的上調錶達現象.
이자성잡색포위대상,이대장간균、부용혈호균、용벽미구균、표피포도구균、금황색포도구균적혼현액주위공독균,이용억제성차감잡교(SSH)기술구건세균공독적잡색포혈림파세포SSH cDNA문고.수궤도취생장균락110개극륭자,진행균액PCR감정,계산문고중조솔위98.18%,문고용량위1.37 × 106pfu.장중조자측서,경BLAST일치성수색비대분석,유일중조편단함유천공소(Perforin)보수결구역,위거서세포표체단백(MEP)류천공소부분cDNA서렬,편단대소위1 551 bp,련속편마517개안기산잔기,신청GenBank등록호위EU272049.경반정량PCR화형광정량PCR차이현시분석,발현재세균감염상태하MEP기인재혈림파세포중존재명현적상조표체현상.
