生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2008年
4期
365-372
,共8页
李星星%何焕玲%吴丽美%左国伟%苗静琨%周兰
李星星%何煥玲%吳麗美%左國偉%苗靜琨%週蘭
리성성%하환령%오려미%좌국위%묘정곤%주란
骨形态发生蛋白%细胞增殖%细胞凋亡%细胞迁移%碱性磷酸酶活性
骨形態髮生蛋白%細胞增殖%細胞凋亡%細胞遷移%堿性燐痠酶活性
골형태발생단백%세포증식%세포조망%세포천이%감성린산매활성
为研究人骨形态发生蛋白(human bone morphogenetic proteins,hBMP)12对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用,分别用hBMP12重组腺病毒(AdBMP12)以及含重组hBMP12(recombinant hBMP12,rhBMP12)的条件培养液干预人骨肉瘤细胞MG63和U2OS,利用台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化.与相应对照组相比,AdBMP12和含rhBMP12的条件培养液的干预致两种骨肉瘤细胞株细胞存活率降低,并呈一定的时间依赖性;凋亡率均随时间延长而增加,并且两种检测方法的结果一致:不同时间点的细胞穿膜数均明显减低;碱性磷酸酶活性在干预3 d后开始逐渐增加.至第9 d仍可观测到.以上差异均有统计学意义(P<0.01).提示无论是以腺病毒介导基因转入还是重组蛋白直接作用方式,hBMP12都可以抑制人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的增殖和迁移,并诱导其凋亡和向成骨细胞分化.
為研究人骨形態髮生蛋白(human bone morphogenetic proteins,hBMP)12對人骨肉瘤細胞株MG63和U2OS的作用,分彆用hBMP12重組腺病毒(AdBMP12)以及含重組hBMP12(recombinant hBMP12,rhBMP12)的條件培養液榦預人骨肉瘤細胞MG63和U2OS,利用檯盼藍拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)熒光雙染法、Transwell小室和堿性燐痠酶活性測定法分彆檢測細胞增殖、凋亡、遷移以及成骨分化能力的變化.與相應對照組相比,AdBMP12和含rhBMP12的條件培養液的榦預緻兩種骨肉瘤細胞株細胞存活率降低,併呈一定的時間依賴性;凋亡率均隨時間延長而增加,併且兩種檢測方法的結果一緻:不同時間點的細胞穿膜數均明顯減低;堿性燐痠酶活性在榦預3 d後開始逐漸增加.至第9 d仍可觀測到.以上差異均有統計學意義(P<0.01).提示無論是以腺病毒介導基因轉入還是重組蛋白直接作用方式,hBMP12都可以抑製人骨肉瘤細胞株MG63和U2OS的增殖和遷移,併誘導其凋亡和嚮成骨細胞分化.
위연구인골형태발생단백(human bone morphogenetic proteins,hBMP)12대인골육류세포주MG63화U2OS적작용,분별용hBMP12중조선병독(AdBMP12)이급함중조hBMP12(recombinant hBMP12,rhBMP12)적조건배양액간예인골육류세포MG63화U2OS,이용태반람거염법、TUNEL법、아정등/추을정(AO/EB)형광쌍염법、Transwell소실화감성린산매활성측정법분별검측세포증식、조망、천이이급성골분화능력적변화.여상응대조조상비,AdBMP12화함rhBMP12적조건배양액적간예치량충골육류세포주세포존활솔강저,병정일정적시간의뢰성;조망솔균수시간연장이증가,병차량충검측방법적결과일치:불동시간점적세포천막수균명현감저;감성린산매활성재간예3 d후개시축점증가.지제9 d잉가관측도.이상차이균유통계학의의(P<0.01).제시무론시이선병독개도기인전입환시중조단백직접작용방식,hBMP12도가이억제인골육류세포주MG63화U2OS적증식화천이,병유도기조망화향성골세포분화.
