CAJ | 학술논문

目的:研究利用RNA干扰抑制Survivin基因的表达对人乳腺癌SKBr-3细胞放射敏感性的影响.方法:构建针对Sur-vivin基因的RNA干扰真核表达载体pSU-PER-S1并转染SKBr-3细胞,分别用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Survivin mR-NA和蛋白表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;平板克隆形成实验计算细胞存活率,用单击多靶数学模型进行曲线拟合做图,求曲线参数D0、Da和N值,比较细胞放射敏感性变化.结果:RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,pSUPER-S1转染后的SKBr-3细胞中Survivin mRNA和蛋白水平显著下降;流式细胞仪检测结果显示,转染后的SKBr-3细胞G1期阻滞明显[(74.03±8.91)%].高于对照组[(44.21±12.03)%],S期细胞数减少[(17.11±4.96)%],低于对照组((43.12±8.64)%],P<0.05;经不同剂量γ射线照射后的细胞存活曲线拟合作图后发现,转染后的细胞D0、N和Dq值均下降(D0=1.29,N=4.9,Dq=2.6),与对照组相比(D0=1.56,N=14.85,Dq=5.21)差异有统计学意义(P<0.05).提示细胞放射增敏感性增加.结论:利用RNA干扰技术抑制Survivin基因在乳腺癌sKBr-3细胞中的表达可以增加其对放疗的敏感性.
목적:연구이용RNA간우억제Survivin기인적표체대인유선암SKBr-3세포방사민감성적영향.방법:구건침대Sur-vivin기인적RNA간우진핵표체재체pSU-PER-S1병전염SKBr-3세포,분별용RT-PCR화단백질인적법검측Survivin mR-NA화단백표체수평적변화;류식세포의검측세포주기;평판극륭형성실험계산세포존활솔,용단격다파수학모형진행곡선의합주도,구곡선삼수D0、Da화N치,비교세포방사민감성변화.결과:RT-PCR화단백질인적법검측결과표명,pSUPER-S1전염후적SKBr-3세포중Survivin mRNA화단백수평현저하강;류식세포의검측결과현시,전염후적SKBr-3세포G1기조체명현[(74.03±8.91)%].고우대조조[(44.21±12.03)%],S기세포수감소[(17.11±4.96)%],저우대조조((43.12±8.64)%],P<0.05;경불동제량γ사선조사후적세포존활곡선의합작도후발현,전염후적세포D0、N화Dq치균하강(D0=1.29,N=4.9,Dq=2.6),여대조조상비(D0=1.56,N=14.85,Dq=5.21)차이유통계학의의(P<0.05).제시세포방사증민감성증가.결론:이용RNA간우기술억제Survivin기인재유선암sKBr-3세포중적표체가이증가기대방료적민감성.