CAJ | 학술논문

目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG-132逆转人结肠癌细胞获得性TRAIL耐药的作用及其可能的机制.方法:在MG-132和TRAIL蛋白联合处理获得性TRAIL耐药的人结肠癌细胞DLD1-TRAIL/R后,MTT法检测细胞的存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测细胞中各种凋亡相关蛋白的表达和JNK激酶的磷酸化水平.结果:MG-132联合TRAIL蛋白处理DLD1-TRAIL/R细胞后,其细胞存活率明显下降(P<0.01),而细胞凋亡率则明显增加(P<0.01).Western blotting检测显示,联合处理后DLD1-TRAIL/R细胞中各种凋亡信号分子包括caspase-8、caspase-9、caspase-3、Bid和PARP蛋白均明显活化,线粒体中细胞色素C和Smac蛋白大量释放;进一步的Western blotting检测显示,死亡受体DR5和凋亡诱导蛋白Bik的表达水平明显增高,而其他凋亡信号分子包括DR4、Bax、Bak、Bcl-XL、XIAP和Survivin等则无明显改变;检测结果还显示,MG-132能诱导JNK激酶发生磷酸化,使用JNK激酶抑制剂SP600125能够阻断MG-132诱导的DR5表达,但不影响Bik的表达,并且不能减弱MG-132和TRAIL蛋白联合处理对DLD1-TRAIL/R细胞的致凋亡效应(P<0.05).结论:蛋白酶体抑制剂MG-132能逆转人结肠癌细胞DLD1-TRAIL/R的获得性TRAIL耐药,其机制可能与Bik蛋白上调后启动线粒体凋亡途径有关,与JNK通路激活无关.
목적:탐토단백매체억제제MG-132역전인결장암세포획득성TRAIL내약적작용급기가능적궤제.방법:재MG-132화TRAIL단백연합처리획득성TRAIL내약적인결장암세포DLD1-TRAIL/R후,MTT법검측세포적존활솔,류식세포술검측세포조망솔,Western blotting검측세포중각충조망상관단백적표체화JNK격매적린산화수평.결과:MG-132연합TRAIL단백처리DLD1-TRAIL/R세포후,기세포존활솔명현하강(P<0.01),이세포조망솔칙명현증가(P<0.01).Western blotting검측현시,연합처리후DLD1-TRAIL/R세포중각충조망신호분자포괄caspase-8、caspase-9、caspase-3、Bid화PARP단백균명현활화,선립체중세포색소C화Smac단백대량석방;진일보적Western blotting검측현시,사망수체DR5화조망유도단백Bik적표체수평명현증고,이기타조망신호분자포괄DR4、Bax、Bak、Bcl-XL、XIAP화Survivin등칙무명현개변;검측결과환현시,MG-132능유도JNK격매발생린산화,사용JNK격매억제제SP600125능구조단MG-132유도적DR5표체,단불영향Bik적표체,병차불능감약MG-132화TRAIL단백연합처리대DLD1-TRAIL/R세포적치조망효응(P<0.05).결론:단백매체억제제MG-132능역전인결장암세포DLD1-TRAIL/R적획득성TRAIL내약,기궤제가능여Bik단백상조후계동선립체조망도경유관,여JNK통로격활무관.