宁夏医学杂志
寧夏醫學雜誌
저하의학잡지
NINGXIA MEDICAL JOURNAL
2009年
12期
1111-1112
,共2页
苏春霞%段相国%张艳丽%摆茹
囌春霞%段相國%張豔麗%襬茹
소춘하%단상국%장염려%파여
口蹄疫病毒%重组腺病毒%表位基因
口蹄疫病毒%重組腺病毒%錶位基因
구제역병독%중조선병독%표위기인
目的 构建串联表达通用型辅助性T淋巴细胞表位(PARDE)和口蹄疫病毒多表位基因的重组腺病毒,并对其进行鉴定.方法 将PARDE串联FMDV的多表位基因克隆到腺病毒的穿梭载体中,利用电转化技术将线性化的阳性穿梭质粒与腺病毒骨架载体pAdeno VatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183感受态细胞,将筛选到的重组病毒质粒经PacⅠ酶线性化后,通过脂质体LipofectamineTM2000转染HEK-293A细胞后得到重组腺病毒,再用RT-PCR和Western-blot检测多表位基因在重组腺病毒中的表达.结果 成功构建了串联表达PARDE和FMDV多表位基因的重组腺病毒rAd5-EGS,Western-blot检测重组腺病毒rAd5-EGS能与FMDV阳性血清发生反应.结论 重组腺病毒rAd5-EGS具有抗原性,经过连续传代至10代后效价稳定.
目的 構建串聯錶達通用型輔助性T淋巴細胞錶位(PARDE)和口蹄疫病毒多錶位基因的重組腺病毒,併對其進行鑒定.方法 將PARDE串聯FMDV的多錶位基因剋隆到腺病毒的穿梭載體中,利用電轉化技術將線性化的暘性穿梭質粒與腺病毒骨架載體pAdeno VatorΔE1/E3共轉化大腸桿菌BJ5183感受態細胞,將篩選到的重組病毒質粒經PacⅠ酶線性化後,通過脂質體LipofectamineTM2000轉染HEK-293A細胞後得到重組腺病毒,再用RT-PCR和Western-blot檢測多錶位基因在重組腺病毒中的錶達.結果 成功構建瞭串聯錶達PARDE和FMDV多錶位基因的重組腺病毒rAd5-EGS,Western-blot檢測重組腺病毒rAd5-EGS能與FMDV暘性血清髮生反應.結論 重組腺病毒rAd5-EGS具有抗原性,經過連續傳代至10代後效價穩定.
목적 구건천련표체통용형보조성T림파세포표위(PARDE)화구제역병독다표위기인적중조선병독,병대기진행감정.방법 장PARDE천련FMDV적다표위기인극륭도선병독적천사재체중,이용전전화기술장선성화적양성천사질립여선병독골가재체pAdeno VatorΔE1/E3공전화대장간균BJ5183감수태세포,장사선도적중조병독질립경PacⅠ매선성화후,통과지질체LipofectamineTM2000전염HEK-293A세포후득도중조선병독,재용RT-PCR화Western-blot검측다표위기인재중조선병독중적표체.결과 성공구건료천련표체PARDE화FMDV다표위기인적중조선병독rAd5-EGS,Western-blot검측중조선병독rAd5-EGS능여FMDV양성혈청발생반응.결론 중조선병독rAd5-EGS구유항원성,경과련속전대지10대후효개은정.
