生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
9期
123-128
,共6页
杨路存%陈桂琛%周国英%宋文珠%李春丽%许璟瑛
楊路存%陳桂琛%週國英%宋文珠%李春麗%許璟瑛
양로존%진계침%주국영%송문주%리춘려%허경영
四数獐牙菜%ISSR-PCR%正交设计%体系优化
四數獐牙菜%ISSR-PCR%正交設計%體繫優化
사수장아채%ISSR-PCR%정교설계%체계우화
采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系中的4种主要因素(Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,PCR结果用统计软件SPSS16.0分析.结果显示,Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP这3因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中Mg2+的浓度影响最大.筛选出各反应因素的最佳水平,建立四数獐牙菜ISSR-PCR反应的最佳体系(25 μL)为3.0 mmol/L Mg2+,250 μmol/L dNTP,0.6 μmol/L引物,1U Taq DNA聚合酶,40 ngDNA,2.5 μL 10×buffer.这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行四数獐牙菜遗传多样性分析以及物种保护奠定了技术基础.
採用正交試驗與單因素設計相結閤的方法,對四數獐牙菜ISSR-PCR反應體繫中的4種主要因素(Mg2+、TaqDNA聚閤酶、dNTP及引物)進行優化篩選,PCR結果用統計軟件SPSS16.0分析.結果顯示,Mg2+、Taq DNA聚閤酶、dNTP這3因素的不同水平對PCR反應結果都有顯著影響,其中Mg2+的濃度影響最大.篩選齣各反應因素的最佳水平,建立四數獐牙菜ISSR-PCR反應的最佳體繫(25 μL)為3.0 mmol/L Mg2+,250 μmol/L dNTP,0.6 μmol/L引物,1U Taq DNA聚閤酶,40 ngDNA,2.5 μL 10×buffer.這一體繫的建立為今後利用ISSR技術進行四數獐牙菜遺傳多樣性分析以及物種保護奠定瞭技術基礎.
채용정교시험여단인소설계상결합적방법,대사수장아채ISSR-PCR반응체계중적4충주요인소(Mg2+、TaqDNA취합매、dNTP급인물)진행우화사선,PCR결과용통계연건SPSS16.0분석.결과현시,Mg2+、Taq DNA취합매、dNTP저3인소적불동수평대PCR반응결과도유현저영향,기중Mg2+적농도영향최대.사선출각반응인소적최가수평,건립사수장아채ISSR-PCR반응적최가체계(25 μL)위3.0 mmol/L Mg2+,250 μmol/L dNTP,0.6 μmol/L인물,1U Taq DNA취합매,40 ngDNA,2.5 μL 10×buffer.저일체계적건립위금후이용ISSR기술진행사수장아채유전다양성분석이급물충보호전정료기술기출.
