表达FLP重组酶pCEP4-FLP载体的构建及其在FLP/FRT重组系统中的应用
표체FLP중조매pCEP4-FLP재체적구건급기재FLP/FRT중조계통중적응용
Construction of FLP Recombinase Expression Vector pCEP4- FLP and Its Application in FLP/FRT System
  • 万方数据
    河北师范大学学报（自然科学版） 하북사범대학학보（자연과학판）
    JOURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
    2012年 3期 291-296 ,共6页

    肖雪宾%袁婷%纪元%宋奇%韩晓蕾%武蓉%林晓晨%欧阳红生%李莉

    초설빈%원정%기원%송기%한효뢰%무용%림효신%구양홍생%리리

    FLP/FRT系统%位点特异性重组%PK-15细胞系 FLP/FRT繫統%位點特異性重組%PK-15細胞繫
    FLP/FRT계통%위점특이성중조%PK-15세포계
    构建重组载体pCEP4-FLP和pEF1a- FRT- stop- FRT - GFP,重组载体pEF1a- FRT- stop-FRT- GFP瞬时转染PK-15细胞24 h后,再将重组载体pCEP4 -FLP瞬时转染该细胞,利用荧光显微镜观察PK-15细胞GFP蛋白的表达情况,利用细胞流式技术统计绿色荧光蛋白表达效率.结果表明:重组载体pCEP4-FLP在细胞内能够表达FLP重组酶,并且表达的FLP重组酶能够识别FRT位点,删除两同向FRT位点间的DNA片段,为FLP/FRT位点特异性重组系统在转基因猪的应用奠定了基础.
    구건중조재체pCEP4-FLP화pEF1a- FRT- stop- FRT - GFP,중조재체pEF1a- FRT- stop-FRT- GFP순시전염PK-15세포24 h후,재장중조재체pCEP4 -FLP순시전염해세포,이용형광현미경관찰PK-15세포GFP단백적표체정황,이용세포류식기술통계록색형광단백표체효솔.결과표명:중조재체pCEP4-FLP재세포내능구표체FLP중조매,병차표체적FLP중조매능구식별FRT위점,산제량동향FRT위점간적DNA편단,위FLP/FRT위점특이성중조계통재전기인저적응용전정료기출.
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