西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2012年
7期
1232-1235
,共4页
王岗%闫斌%巩守平%高亚%董新
王崗%閆斌%鞏守平%高亞%董新
왕강%염빈%공수평%고아%동신
神经嵴细胞%分化%平滑肌细胞%吗啉基反义寡聚核苷酸%hnRNPA2/B1
神經嵴細胞%分化%平滑肌細胞%嗎啉基反義寡聚覈苷痠%hnRNPA2/B1
신경척세포%분화%평활기세포%마람기반의과취핵감산%hnRNPA2/B1
目的 建立一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化.方法 使用鸡胚在体电转染的方法导入绿色荧光蛋白示踪或核内不均—核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)特异性吗啉基反义寡聚核苷酸(morpholino)干扰其基因表达.通过分析鸡胚的成活率及转染率确定在体转染的设备参数,之后将胚胎固定、包埋、冰冻切片并进行免疫组织化学染色,在荧光显微镜下观察神经嵴细胞的标记、迁徙及向平滑肌细胞的分化.结果 转染电压为7.5V时胚胎成活率和转染率均较高,因此在本实验中作为标准电压.电转后6小时,右侧神经嵴细胞成功表达绿色荧光蛋白.第2天,神经嵴细胞开始向腮弓迁徙并达到第2、3鳃弓.hnRNPA2/B1 特异性morpholino可以抑制hnRNPA2/B1的表达从而影响神经嵴细胞的迁徙和分化,导致鳃弓动脉平滑肌层形成障碍,最终破裂.结论 鸡胚在体基因干扰技术被成功建立并可用来研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化.
目的 建立一種在體基因榦擾技術研究神經嵴細胞嚮平滑肌細胞分化.方法 使用鷄胚在體電轉染的方法導入綠色熒光蛋白示蹤或覈內不均—覈糖覈蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)特異性嗎啉基反義寡聚覈苷痠(morpholino)榦擾其基因錶達.通過分析鷄胚的成活率及轉染率確定在體轉染的設備參數,之後將胚胎固定、包埋、冰凍切片併進行免疫組織化學染色,在熒光顯微鏡下觀察神經嵴細胞的標記、遷徙及嚮平滑肌細胞的分化.結果 轉染電壓為7.5V時胚胎成活率和轉染率均較高,因此在本實驗中作為標準電壓.電轉後6小時,右側神經嵴細胞成功錶達綠色熒光蛋白.第2天,神經嵴細胞開始嚮腮弓遷徙併達到第2、3鰓弓.hnRNPA2/B1 特異性morpholino可以抑製hnRNPA2/B1的錶達從而影響神經嵴細胞的遷徙和分化,導緻鰓弓動脈平滑肌層形成障礙,最終破裂.結論 鷄胚在體基因榦擾技術被成功建立併可用來研究神經嵴細胞嚮平滑肌細胞分化.
목적 건립일충재체기인간우기술연구신경척세포향평활기세포분화.방법 사용계배재체전전염적방법도입록색형광단백시종혹핵내불균—핵당핵단백A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)특이성마람기반의과취핵감산(morpholino)간우기기인표체.통과분석계배적성활솔급전염솔학정재체전염적설비삼수,지후장배태고정、포매、빙동절편병진행면역조직화학염색,재형광현미경하관찰신경척세포적표기、천사급향평활기세포적분화.결과 전염전압위7.5V시배태성활솔화전염솔균교고,인차재본실험중작위표준전압.전전후6소시,우측신경척세포성공표체록색형광단백.제2천,신경척세포개시향시궁천사병체도제2、3새궁.hnRNPA2/B1 특이성morpholino가이억제hnRNPA2/B1적표체종이영향신경척세포적천사화분화,도치새궁동맥평활기층형성장애,최종파렬.결론 계배재체기인간우기술피성공건립병가용래연구신경척세포향평활기세포분화.
