自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2005年
1期
53-60
,共8页
恒河猴 差异基因 SSH H11 胚胎植入
恆河猴 差異基因 SSH H11 胚胎植入
항하후 차이기인 SSH H11 배태식입
采用cap-finder全长cDNA扩增技术和抑制消减杂交(SSH)相结合的方法研究了恒河猴胚胎植入初始时期子宫内膜植入位点与非植入位点的基因表达差异情况.在准确获取妊娠9.5 d恒河猴植入位点和非植入位点子宫内膜后,用SSH建立了植入位点消减cDNA文库,从中随机挑选了1440个克隆,通过点杂交获得了179个在植入位点高表达的克隆,经测序和与基因库(Gen-Bank/EMBL)比对分析,证实其中102个克隆对应于人或恒河猴的52个同源基因,75个克隆对应于人的58个EST,另外2个克隆没有找到对应的同源基因,推测为新的基因.对其中最高频率出现的差异表达基因-蛋白激酶H11,通过cDNA末端快速扩增(RACE)法克隆得到了它的全长cDNA序列.与人的蛋白激酶H11相比,cDNA序列同源性达到94%,所编码的蛋白质序列同源性为83%
採用cap-finder全長cDNA擴增技術和抑製消減雜交(SSH)相結閤的方法研究瞭恆河猴胚胎植入初始時期子宮內膜植入位點與非植入位點的基因錶達差異情況.在準確穫取妊娠9.5 d恆河猴植入位點和非植入位點子宮內膜後,用SSH建立瞭植入位點消減cDNA文庫,從中隨機挑選瞭1440箇剋隆,通過點雜交穫得瞭179箇在植入位點高錶達的剋隆,經測序和與基因庫(Gen-Bank/EMBL)比對分析,證實其中102箇剋隆對應于人或恆河猴的52箇同源基因,75箇剋隆對應于人的58箇EST,另外2箇剋隆沒有找到對應的同源基因,推測為新的基因.對其中最高頻率齣現的差異錶達基因-蛋白激酶H11,通過cDNA末耑快速擴增(RACE)法剋隆得到瞭它的全長cDNA序列.與人的蛋白激酶H11相比,cDNA序列同源性達到94%,所編碼的蛋白質序列同源性為83%
채용cap-finder전장cDNA확증기술화억제소감잡교(SSH)상결합적방법연구료항하후배태식입초시시기자궁내막식입위점여비식입위점적기인표체차이정황.재준학획취임신9.5 d항하후식입위점화비식입위점자궁내막후,용SSH건립료식입위점소감cDNA문고,종중수궤도선료1440개극륭,통과점잡교획득료179개재식입위점고표체적극륭,경측서화여기인고(Gen-Bank/EMBL)비대분석,증실기중102개극륭대응우인혹항하후적52개동원기인,75개극륭대응우인적58개EST,령외2개극륭몰유조도대응적동원기인,추측위신적기인.대기중최고빈솔출현적차이표체기인-단백격매H11,통과cDNA말단쾌속확증(RACE)법극륭득도료타적전장cDNA서렬.여인적단백격매H11상비,cDNA서렬동원성체도94%,소편마적단백질서렬동원성위83%
