中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
18期
3559-3562
,共4页
目的:观察微囊化兔嗅球组织细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤后细胞凋亡及功能恢复的影响,并探讨其对脊髓继发性损伤的保护作用及其机制.方法:实验于2004-10/2005-07在南昌大学基础医学院应用解剖研究室完成.选择清洁级SD大白鼠120只,按随机数字表法分为4组:正常对照组、损伤对照组、单纯细胞悬液移植组、微囊化移植组,每组30只.制作T10节段脊髓全横断损伤模型.正常对照组仅打开椎管,暴露脊髓不作移植;损伤对照组仅用明胶海绵填塞脊髓损伤腔隙;单纯细胞悬液移植组植入吸附细胞悬液的明胶海绵块;微囊化移植组用与断端腔隙大小相吻合的明胶海绵块吸附10μL的微囊化细胞,植入洞腔.分别于术后12 h,1,3,7,21 d 5个时间点对动物进行BBB评分后处死.取损伤区1 cm范围脊髓节段,常规石蜡包埋,水平切片进行苏木精-伊红染色、TUNEL染色,观察凋亡细胞的数量及分布变化.按BBB评分法对大鼠术后运动功能的恢复情况进行评分.共分22级,最低分0分,最高分21分,分数越高,运动功能恢复越完善.结果:纳入大鼠120只,存活96只,存活率为80%.其中以损伤对照组及单纯细胞悬液移植组死亡率较高,损伤对照组大鼠死亡的主要原因可能是脊髓损伤导致损伤平面以下神经功能的丧失所引起的一系列并发症所导致的;而单纯细胞悬液移植组是因为免疫排斥反应所导致.①术后3 d内各组间BBB评分差异无显著性意义(P＞0.05);术后7,21 d微囊化移植组和单纯细胞悬液移植组大鼠BBB评分高于损伤对照组,差异均有显著性意义[分别为(7.25±1.17),(4.58+0.38),(2.67±0.61)分;(10.42±1.63).(6.08±0.80),(3.33±0.68)分,F=4.528,3.821,P＜0.05],且经微囊化处理后比单纯兔嗅球组织细胞悬液移植运动功能恢复更好(F=4.112,P＜0.05);而损伤对照组大鼠后肢运动功能恢复均较差.②光镜下损伤对照组、单纯细胞悬液移植组脊髓损伤后,脊髓内空洞增大,损伤范围基本确定,周围有炎性细胞浸润;在微囊化移植组脊髓损伤明显减轻,细胞皱缩不明显、胞质、胞核较清晰.③术后1,3,7 d微囊化移植组TUNEL阳性细胞数及凋亡指数低于损伤对照组,差异有显著性意义(以术后3 d为例,TUNEL阳性细胞数分别为(8.83±1 33),(14.50±1.05)个,视野,P＜0.01;凋亡指数分别为10.45±1.58,17.06±1.23,P＜0.01).结论:微囊化兔嗅球组织细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤后细胞凋亡具有保护作用,能促进脊髓功能的恢复.
目的:觀察微囊化兔嗅毬組織細胞移植對大鼠脊髓全橫斷損傷後細胞凋亡及功能恢複的影響,併探討其對脊髓繼髮性損傷的保護作用及其機製.方法:實驗于2004-10/2005-07在南昌大學基礎醫學院應用解剖研究室完成.選擇清潔級SD大白鼠120隻,按隨機數字錶法分為4組:正常對照組、損傷對照組、單純細胞懸液移植組、微囊化移植組,每組30隻.製作T10節段脊髓全橫斷損傷模型.正常對照組僅打開椎管,暴露脊髓不作移植;損傷對照組僅用明膠海綿填塞脊髓損傷腔隙;單純細胞懸液移植組植入吸附細胞懸液的明膠海綿塊;微囊化移植組用與斷耑腔隙大小相吻閤的明膠海綿塊吸附10μL的微囊化細胞,植入洞腔.分彆于術後12 h,1,3,7,21 d 5箇時間點對動物進行BBB評分後處死.取損傷區1 cm範圍脊髓節段,常規石蠟包埋,水平切片進行囌木精-伊紅染色、TUNEL染色,觀察凋亡細胞的數量及分佈變化.按BBB評分法對大鼠術後運動功能的恢複情況進行評分.共分22級,最低分0分,最高分21分,分數越高,運動功能恢複越完善.結果:納入大鼠120隻,存活96隻,存活率為80%.其中以損傷對照組及單純細胞懸液移植組死亡率較高,損傷對照組大鼠死亡的主要原因可能是脊髓損傷導緻損傷平麵以下神經功能的喪失所引起的一繫列併髮癥所導緻的;而單純細胞懸液移植組是因為免疫排斥反應所導緻.①術後3 d內各組間BBB評分差異無顯著性意義(P＞0.05);術後7,21 d微囊化移植組和單純細胞懸液移植組大鼠BBB評分高于損傷對照組,差異均有顯著性意義[分彆為(7.25±1.17),(4.58+0.38),(2.67±0.61)分;(10.42±1.63).(6.08±0.80),(3.33±0.68)分,F=4.528,3.821,P＜0.05],且經微囊化處理後比單純兔嗅毬組織細胞懸液移植運動功能恢複更好(F=4.112,P＜0.05);而損傷對照組大鼠後肢運動功能恢複均較差.②光鏡下損傷對照組、單純細胞懸液移植組脊髓損傷後,脊髓內空洞增大,損傷範圍基本確定,週圍有炎性細胞浸潤;在微囊化移植組脊髓損傷明顯減輕,細胞皺縮不明顯、胞質、胞覈較清晰.③術後1,3,7 d微囊化移植組TUNEL暘性細胞數及凋亡指數低于損傷對照組,差異有顯著性意義(以術後3 d為例,TUNEL暘性細胞數分彆為(8.83±1 33),(14.50±1.05)箇,視野,P＜0.01;凋亡指數分彆為10.45±1.58,17.06±1.23,P＜0.01).結論:微囊化兔嗅毬組織細胞移植對大鼠脊髓全橫斷損傷後細胞凋亡具有保護作用,能促進脊髓功能的恢複.
목적:관찰미낭화토후구조직세포이식대대서척수전횡단손상후세포조망급공능회복적영향,병탐토기대척수계발성손상적보호작용급기궤제.방법:실험우2004-10/2005-07재남창대학기출의학원응용해부연구실완성.선택청길급SD대백서120지,안수궤수자표법분위4조:정상대조조、손상대조조、단순세포현액이식조、미낭화이식조,매조30지.제작T10절단척수전횡단손상모형.정상대조조부타개추관,폭로척수불작이식;손상대조조부용명효해면전새척수손상강극;단순세포현액이식조식입흡부세포현액적명효해면괴;미낭화이식조용여단단강극대소상문합적명효해면괴흡부10μL적미낭화세포,식입동강.분별우술후12 h,1,3,7,21 d 5개시간점대동물진행BBB평분후처사.취손상구1 cm범위척수절단,상규석사포매,수평절편진행소목정-이홍염색、TUNEL염색,관찰조망세포적수량급분포변화.안BBB평분법대대서술후운동공능적회복정황진행평분.공분22급,최저분0분,최고분21분,분수월고,운동공능회복월완선.결과:납입대서120지,존활96지,존활솔위80%.기중이손상대조조급단순세포현액이식조사망솔교고,손상대조조대서사망적주요원인가능시척수손상도치손상평면이하신경공능적상실소인기적일계렬병발증소도치적;이단순세포현액이식조시인위면역배척반응소도치.①술후3 d내각조간BBB평분차이무현저성의의(P＞0.05);술후7,21 d미낭화이식조화단순세포현액이식조대서BBB평분고우손상대조조,차이균유현저성의의[분별위(7.25±1.17),(4.58+0.38),(2.67±0.61)분;(10.42±1.63).(6.08±0.80),(3.33±0.68)분,F=4.528,3.821,P＜0.05],차경미낭화처리후비단순토후구조직세포현액이식운동공능회복경호(F=4.112,P＜0.05);이손상대조조대서후지운동공능회복균교차.②광경하손상대조조、단순세포현액이식조척수손상후,척수내공동증대,손상범위기본학정,주위유염성세포침윤;재미낭화이식조척수손상명현감경,세포추축불명현、포질、포핵교청석.③술후1,3,7 d미낭화이식조TUNEL양성세포수급조망지수저우손상대조조,차이유현저성의의(이술후3 d위례,TUNEL양성세포수분별위(8.83±1 33),(14.50±1.05)개,시야,P＜0.01;조망지수분별위10.45±1.58,17.06±1.23,P＜0.01).결론:미낭화토후구조직세포이식대대서척수전횡단손상후세포조망구유보호작용,능촉진척수공능적회복.
