CAJ | 학술논문

目的研究重组纤黏连蛋白(FN)多肽CH50对小鼠黑色素瘤B16细胞体内转移的影响,以探讨CH50多肽抑制肿瘤转移的可能分子机制.方法体外培养黑色素瘤B16细胞,用荧光染料CFSE标记,接种脾脏后24 h取脾、肝、肺做冰冻切片,观察肿瘤细胞在3种组织中的侵袭情况.从脾脏接种B16细胞,建立体内肿瘤转移动物模型,采用基于流体动力学的体内基因转染方法于小鼠体内表达CH50多肽,RT-PCR检测CH50 mRNA在肝组织的表达,Western印迹检测CH50多肽的表达.通过比较原位肿瘤结节及转移结节在数量、大小、分布上的差异及检测原位肿瘤组织中MMP-2、MMP-9表达差异,观察CH50多肽的治疗效果.结果注射24 h后即可在脾脏形成荧光结节.pCH510质粒通过尾静脉注射后,可在肝组织中检测到CH50 mRNA及CH50多肽的表达.从脾脏接种B16细胞后第14天可在脾脏形成原发肿瘤,至第35天肝脏表面已形成转移瘤结节,成功建立了体内器官间(脾转肝)肿瘤转移动物模型.体内转染表达CH50多肽能抑制肿瘤生长、侵袭和转移,抑制原位肿瘤结节中MMP-2、MMP-9的表达.结论 CH50多肽可以通过对MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用来抑制黑色素瘤B16细胞的成瘤能力和体内侵袭、转移能力.
목적 연구중조섬점련단백(FN)다태CH50대소서흑색소류B16세포체내전이적영향,이탐토CH50다태억제종류전이적가능분자궤제.방법 체외배양흑색소류B16세포,용형광염료CFSE표기,접충비장후24 h취비、간、폐주빙동절편,관찰종류세포재3충조직중적침습정황.종비장접충B16세포,건입체내종류전이동물모형,채용기우류체동역학적체내기인전염방법우소서체내표체CH50다태,RT-PCR검측CH50 mRNA재간조직적표체,Western인적검측CH50다태적표체.통과비교원위종류결절급전이결절재수량、대소、분포상적차이급검측원위종류조직중MMP-2、MMP-9표체차이,관찰CH50다태적치료효과.결과 주사24 h후즉가재비장형성형광결절.pCH510질립통과미정맥주사후,가재간조직중검측도CH50 mRNA급CH50다태적표체.종비장접충B16세포후제14천가재비장형성원발종류,지제35천간장표면이형성전이류결절,성공건립료체내기관간(비전간)종류전이동물모형.체내전염표체CH50다태능억제종류생장、침습화전이,억제원위종류결절중MMP-2、MMP-9적표체.결론 CH50다태가이통과대MMP-2、MMP-9단백표체적억제작용래억제흑색소류B16세포적성류능력화체내침습、전이능력.