中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
15期
2801-2805
,共5页
田志逢%秦书俭%王瑞芳%柏永刚%谷学静
田誌逢%秦書儉%王瑞芳%柏永剛%穀學靜
전지봉%진서검%왕서방%백영강%곡학정
骨髓间充质干细胞%骨基质明胶%异种%细胞培养%骨缺损%组织构建
骨髓間充質榦細胞%骨基質明膠%異種%細胞培養%骨缺損%組織構建
골수간충질간세포%골기질명효%이충%세포배양%골결손%조직구건
目的:在骨组织工程学领域内,主要集中种子细胞、支架载体和细胞支架复合体的构建3个方面的研究,在干细胞方面大多数学者认为骨髓间充质干细胞较为理想,支架材料虽然种类繁多,但却没有一种理想的载体.实验拟通过观察骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体植入骨缺损处成骨性细胞的变化以及钙化情况,认识同种骨髓间充质干细胞复合异种骨基质明胶修复大鼠桡骨节段性骨缺损的可行性.方法:实验于2006-10/2007-08在辽宁医学院解剖学试验室与科学实验中心完成.①骨髓间充质干细胞体外培养、纯化、扩增、Brd-U体外标记后并在体外与骨基质明胶复合培养,制成骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体.②60只SD大鼠采用随机数字表法分为骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体治疗组、单纯骨基质明胶治疗组和单纯骨髓间充质干细胞治疗组,每组20只;每组分2,4,8,12周4个时间段,每个时间段5只.实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求.③制备同种异体SD大鼠桡骨骨干5mm节段性骨缺损模型.骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体治疗组缺损处植入骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体,单纯骨基质明胶治疗组缺损处植入单纯骨基质明胶(骨基质明胶由完全培养液同等条件下培养7d),单纯骨髓间充质干细胞治疗组缺损处植入单纯骨髓间充质干细胞(Brd-U标记的第3代骨髓间充质干细胞,密度1×109个/L).④大体观察大鼠的术肢活动情况;X射线放射学、组织学对比观察各组大鼠骨缺损的修复情况.结果:除骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体治疗组有1例动物因麻醉过深死亡外,其余59只大鼠进入结果分析.①各组术后各时间段骨缺区X射线片表现:骨髓间充质干细胞,骨基质明胶复合体治疗组:2周桡骨缺损处略见骨痂形成,8周可见明显形成骨缺损区的桥接,12周骨缺损区完全被新生骨组织填充,已有骨髓腔出现.单纯骨基质明胶治疗组:12周骨缺损区骨痂形成增多,但未出现桥接,并可见两端有骨质硬化现象.单纯骨髓间充质干细胞治疗组:12周可见两断端有骨质硬化现象,最后形成骨不连.术后2,4,8,12周复合体治疗组与单纯治疗组放射学检查评价新骨生成差异有显著性意义(P＜0.01).②组织学检测结果:术后2,4,8,12周复合体治疗组与单纯治疗组组织学榆查新骨生成速度、生成量差异均有显著性意义(P＜0.01).结论:骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体有较强的成骨能力,对节段性骨缺损有较好的修复作用,有望成为骨组织工程中可以选择的植骨材料.
目的:在骨組織工程學領域內,主要集中種子細胞、支架載體和細胞支架複閤體的構建3箇方麵的研究,在榦細胞方麵大多數學者認為骨髓間充質榦細胞較為理想,支架材料雖然種類繁多,但卻沒有一種理想的載體.實驗擬通過觀察骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體植入骨缺損處成骨性細胞的變化以及鈣化情況,認識同種骨髓間充質榦細胞複閤異種骨基質明膠脩複大鼠橈骨節段性骨缺損的可行性.方法:實驗于2006-10/2007-08在遼寧醫學院解剖學試驗室與科學實驗中心完成.①骨髓間充質榦細胞體外培養、純化、擴增、Brd-U體外標記後併在體外與骨基質明膠複閤培養,製成骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體.②60隻SD大鼠採用隨機數字錶法分為骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體治療組、單純骨基質明膠治療組和單純骨髓間充質榦細胞治療組,每組20隻;每組分2,4,8,12週4箇時間段,每箇時間段5隻.實驗過程中對動物處置符閤動物倫理學要求.③製備同種異體SD大鼠橈骨骨榦5mm節段性骨缺損模型.骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體治療組缺損處植入骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體,單純骨基質明膠治療組缺損處植入單純骨基質明膠(骨基質明膠由完全培養液同等條件下培養7d),單純骨髓間充質榦細胞治療組缺損處植入單純骨髓間充質榦細胞(Brd-U標記的第3代骨髓間充質榦細胞,密度1×109箇/L).④大體觀察大鼠的術肢活動情況;X射線放射學、組織學對比觀察各組大鼠骨缺損的脩複情況.結果:除骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體治療組有1例動物因痳醉過深死亡外,其餘59隻大鼠進入結果分析.①各組術後各時間段骨缺區X射線片錶現:骨髓間充質榦細胞,骨基質明膠複閤體治療組:2週橈骨缺損處略見骨痂形成,8週可見明顯形成骨缺損區的橋接,12週骨缺損區完全被新生骨組織填充,已有骨髓腔齣現.單純骨基質明膠治療組:12週骨缺損區骨痂形成增多,但未齣現橋接,併可見兩耑有骨質硬化現象.單純骨髓間充質榦細胞治療組:12週可見兩斷耑有骨質硬化現象,最後形成骨不連.術後2,4,8,12週複閤體治療組與單純治療組放射學檢查評價新骨生成差異有顯著性意義(P＜0.01).②組織學檢測結果:術後2,4,8,12週複閤體治療組與單純治療組組織學榆查新骨生成速度、生成量差異均有顯著性意義(P＜0.01).結論:骨髓間充質榦細胞/骨基質明膠複閤體有較彊的成骨能力,對節段性骨缺損有較好的脩複作用,有望成為骨組織工程中可以選擇的植骨材料.
목적:재골조직공정학영역내,주요집중충자세포、지가재체화세포지가복합체적구건3개방면적연구,재간세포방면대다수학자인위골수간충질간세포교위이상,지가재료수연충류번다,단각몰유일충이상적재체.실험의통과관찰골수간충질간세포/골기질명효복합체식입골결손처성골성세포적변화이급개화정황,인식동충골수간충질간세포복합이충골기질명효수복대서뇨골절단성골결손적가행성.방법:실험우2006-10/2007-08재료녕의학원해부학시험실여과학실험중심완성.①골수간충질간세포체외배양、순화、확증、Brd-U체외표기후병재체외여골기질명효복합배양,제성골수간충질간세포/골기질명효복합체.②60지SD대서채용수궤수자표법분위골수간충질간세포/골기질명효복합체치료조、단순골기질명효치료조화단순골수간충질간세포치료조,매조20지;매조분2,4,8,12주4개시간단,매개시간단5지.실험과정중대동물처치부합동물윤리학요구.③제비동충이체SD대서뇨골골간5mm절단성골결손모형.골수간충질간세포/골기질명효복합체치료조결손처식입골수간충질간세포/골기질명효복합체,단순골기질명효치료조결손처식입단순골기질명효(골기질명효유완전배양액동등조건하배양7d),단순골수간충질간세포치료조결손처식입단순골수간충질간세포(Brd-U표기적제3대골수간충질간세포,밀도1×109개/L).④대체관찰대서적술지활동정황;X사선방사학、조직학대비관찰각조대서골결손적수복정황.결과:제골수간충질간세포/골기질명효복합체치료조유1례동물인마취과심사망외,기여59지대서진입결과분석.①각조술후각시간단골결구X사선편표현:골수간충질간세포,골기질명효복합체치료조:2주뇨골결손처략견골가형성,8주가견명현형성골결손구적교접,12주골결손구완전피신생골조직전충,이유골수강출현.단순골기질명효치료조:12주골결손구골가형성증다,단미출현교접,병가견량단유골질경화현상.단순골수간충질간세포치료조:12주가견량단단유골질경화현상,최후형성골불련.술후2,4,8,12주복합체치료조여단순치료조방사학검사평개신골생성차이유현저성의의(P＜0.01).②조직학검측결과:술후2,4,8,12주복합체치료조여단순치료조조직학유사신골생성속도、생성량차이균유현저성의의(P＜0.01).결론:골수간충질간세포/골기질명효복합체유교강적성골능력,대절단성골결손유교호적수복작용,유망성위골조직공정중가이선택적식골재료.
