北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2008年
4期
347-351
,共5页
关立照%沈棋%孙颖%王教辰%龚一蕾%侯琳%张波
關立照%瀋棋%孫穎%王教辰%龔一蕾%侯琳%張波
관립조%침기%손영%왕교신%공일뢰%후림%장파
人乙酰转移酶样蛋白%细胞核仁%肿瘤
人乙酰轉移酶樣蛋白%細胞覈仁%腫瘤
인을선전이매양단백%세포핵인%종류
目的:探讨端粒酶调节相关蛋白--人乙酰转移酶样蛋白(hALP)核仁定位的分子基础及相关功能.方法:利用免疫荧光及免疫电镜的方法检测hALf在HeLa及Saos2细胞中的分布情况,通过rDNA荧光原位杂交及免疫荧光观察hALP与rDNA定位关系,利用BNA干扰的方法进一步证明其核仁定位性,通过基因重组构建包含不同长度片段的hALP基因的真核表达质粒并转染细胞以探讨其核仁定位的分子基础,运用免疫组织化学的方法检测hALP在多种肿瘤组织中的表达情况.结果:ALP在HeLa及Saos2细胞分裂间期主要定位于核仁,并与rDNA有共定位.免疫电镜显示,hALP主要位于核仁的颗粒区;RNA干扰后hALP在核仁区的染色明显减弱;其核仁定位由hALP羧基端的功能域介导.hALP蛋白表达于多种人肿瘤细胞(如平滑肌肉瘤、原始神经外胚叶瘤、神经母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌及肾透明细胞癌)的核仁.结论:ALP蛋白具有明显的核仁定位性,并由其特异性的功能域介导,hALP可表达于多种肿瘤细胞的核仁,其意义值得进一步探讨.
目的:探討耑粒酶調節相關蛋白--人乙酰轉移酶樣蛋白(hALP)覈仁定位的分子基礎及相關功能.方法:利用免疫熒光及免疫電鏡的方法檢測hALf在HeLa及Saos2細胞中的分佈情況,通過rDNA熒光原位雜交及免疫熒光觀察hALP與rDNA定位關繫,利用BNA榦擾的方法進一步證明其覈仁定位性,通過基因重組構建包含不同長度片段的hALP基因的真覈錶達質粒併轉染細胞以探討其覈仁定位的分子基礎,運用免疫組織化學的方法檢測hALP在多種腫瘤組織中的錶達情況.結果:ALP在HeLa及Saos2細胞分裂間期主要定位于覈仁,併與rDNA有共定位.免疫電鏡顯示,hALP主要位于覈仁的顆粒區;RNA榦擾後hALP在覈仁區的染色明顯減弱;其覈仁定位由hALP羧基耑的功能域介導.hALP蛋白錶達于多種人腫瘤細胞(如平滑肌肉瘤、原始神經外胚葉瘤、神經母細胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌及腎透明細胞癌)的覈仁.結論:ALP蛋白具有明顯的覈仁定位性,併由其特異性的功能域介導,hALP可錶達于多種腫瘤細胞的覈仁,其意義值得進一步探討.
목적:탐토단립매조절상관단백--인을선전이매양단백(hALP)핵인정위적분자기출급상관공능.방법:이용면역형광급면역전경적방법검측hALf재HeLa급Saos2세포중적분포정황,통과rDNA형광원위잡교급면역형광관찰hALP여rDNA정위관계,이용BNA간우적방법진일보증명기핵인정위성,통과기인중조구건포함불동장도편단적hALP기인적진핵표체질립병전염세포이탐토기핵인정위적분자기출,운용면역조직화학적방법검측hALP재다충종류조직중적표체정황.결과:ALP재HeLa급Saos2세포분렬간기주요정위우핵인,병여rDNA유공정위.면역전경현시,hALP주요위우핵인적과립구;RNA간우후hALP재핵인구적염색명현감약;기핵인정위유hALP최기단적공능역개도.hALP단백표체우다충인종류세포(여평활기육류、원시신경외배협류、신경모세포류、흑색소류、전렬선암급신투명세포암)적핵인.결론:ALP단백구유명현적핵인정위성,병유기특이성적공능역개도,hALP가표체우다충종류세포적핵인,기의의치득진일보탐토.
