广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2008年
4期
304-308
,共5页
李日聪%王锦%薛林涛%覃琦丽%陈自洪%石德顺
李日聰%王錦%薛林濤%覃琦麗%陳自洪%石德順
리일총%왕금%설림도%담기려%진자홍%석덕순
猪体细胞核移植%电融合%电场强度%脉冲时间%脉冲次数%交流电
豬體細胞覈移植%電融閤%電場彊度%脈遲時間%脈遲次數%交流電
저체세포핵이식%전융합%전장강도%맥충시간%맥충차수%교류전
本研究用体外成熟42~46 h的猪卵母细胞为核移植受体,猪颗粒细胞为核移植供体,对猪体细胞核移植的电融合参数进行了探讨.结果发现,当脉冲时间为40 μs时,0.77 kV/cm组的融合率(59.3%)明显高于1.54 kV/cm组(38.6%,P<0.05),分裂率(77.8%)及桑椹胚/囊胚发育率(33.3%)显著高于2.31 kV/cm组(52.2%,13.6%,P<0.05);当电场强度为0.77 kV/cm时,20 μs组的融合率(68.0%)明显高于30 μs组和40 μs组(42.7%和35.5%,P<0.05),分裂率(89.3%)明显高于脉冲时间为40 μs组(60.5%);当电场强度为0.77 kV/cm,脉冲时间为20 μs时,电脉冲1次的融合率(72.8%)明显高于电脉冲2次(56.0%,P<0.05),在直流电脉冲前是否施加交流电(1.0 V)对融合率(70.0% vs 76.0%)、分裂率(77.3% vs 75.0%)以及胚胎发育率(17.3% vs 18.4%)均无显著影响(P>0.05).以上结果表明,在本所实验室条件下,猪体细胞核移植中的适宜电融合参数为: 0.77 kV/cm,20 μs,电脉冲1次,这将为随后的猪体细胞核移植奠定了基础.
本研究用體外成熟42~46 h的豬卵母細胞為覈移植受體,豬顆粒細胞為覈移植供體,對豬體細胞覈移植的電融閤參數進行瞭探討.結果髮現,噹脈遲時間為40 μs時,0.77 kV/cm組的融閤率(59.3%)明顯高于1.54 kV/cm組(38.6%,P<0.05),分裂率(77.8%)及桑椹胚/囊胚髮育率(33.3%)顯著高于2.31 kV/cm組(52.2%,13.6%,P<0.05);噹電場彊度為0.77 kV/cm時,20 μs組的融閤率(68.0%)明顯高于30 μs組和40 μs組(42.7%和35.5%,P<0.05),分裂率(89.3%)明顯高于脈遲時間為40 μs組(60.5%);噹電場彊度為0.77 kV/cm,脈遲時間為20 μs時,電脈遲1次的融閤率(72.8%)明顯高于電脈遲2次(56.0%,P<0.05),在直流電脈遲前是否施加交流電(1.0 V)對融閤率(70.0% vs 76.0%)、分裂率(77.3% vs 75.0%)以及胚胎髮育率(17.3% vs 18.4%)均無顯著影響(P>0.05).以上結果錶明,在本所實驗室條件下,豬體細胞覈移植中的適宜電融閤參數為: 0.77 kV/cm,20 μs,電脈遲1次,這將為隨後的豬體細胞覈移植奠定瞭基礎.
본연구용체외성숙42~46 h적저란모세포위핵이식수체,저과립세포위핵이식공체,대저체세포핵이식적전융합삼수진행료탐토.결과발현,당맥충시간위40 μs시,0.77 kV/cm조적융합솔(59.3%)명현고우1.54 kV/cm조(38.6%,P<0.05),분렬솔(77.8%)급상심배/낭배발육솔(33.3%)현저고우2.31 kV/cm조(52.2%,13.6%,P<0.05);당전장강도위0.77 kV/cm시,20 μs조적융합솔(68.0%)명현고우30 μs조화40 μs조(42.7%화35.5%,P<0.05),분렬솔(89.3%)명현고우맥충시간위40 μs조(60.5%);당전장강도위0.77 kV/cm,맥충시간위20 μs시,전맥충1차적융합솔(72.8%)명현고우전맥충2차(56.0%,P<0.05),재직류전맥충전시부시가교류전(1.0 V)대융합솔(70.0% vs 76.0%)、분렬솔(77.3% vs 75.0%)이급배태발육솔(17.3% vs 18.4%)균무현저영향(P>0.05).이상결과표명,재본소실험실조건하,저체세포핵이식중적괄의전융합삼수위: 0.77 kV/cm,20 μs,전맥충1차,저장위수후적저체세포핵이식전정료기출.
