CAJ | 학술논문

背景:脂肪组织来源干细胞是位于脂肪荩质内的一种细胞,具有多向分化潜能,可以定向分化成多种细胞类型.目的:探索兔脂肪组织来源干细胞体外生长特性及胶原酶消化适宜条件.设计、时间及地点:细胞分子生物学实验,2008 05/09在解放军南京军区福州总医院比较医学科及实验科完成.材料:日本大耳白兔5只.Ⅰ型胶原酶为美国Worthington公司产品,低糖DMEM/F12培养液为美国Gibco公司产品.方法:兔颈后部皮下脂肪取材,采用Ⅰ胶原酶消化法获取细胞,按Ⅰ型胶原酶消化质量浓度分为1.0,1.5,2.0 g/L 3组,每组再按消化时间分为0.5,1,1.5 h3个亚组.脂肪组织剪碎混匀后均分为9等分,最后重悬细胞终体积均定为2mL并计数,每个亚组计数6次,共取5次脂肪组织,采用含血清的DMEM培养液体外培养细胞.主要观察指标:细胞体外生长特性并比较不同胶原酶浓度、胶原酶消化时间对兔脂肪来源干细胞体外培养的影响.结果:采用1.0,1.5,2.0 g/L三种不同胶原酶浓度进行消化,发现在消化时间为0.5 h和1 h时,2.0 g/L组消化细胞总数最多,细胞总数与其他组比较.差异有显著性意义(P<0.01).在消化时间为1.5 h时,消化细胞总数较0.5 h和1 h均有增加,同时,1.0,1.5,2.0 g/L组消化细胞总数无统计学差异,活细胞比值1.0g/L组最高,但与其他组无统计学差异,观察第3代细胞生长特性,1.0 g/L消化1.5 h组别具有更好的增殖活性.结论:脂肪来源干细胞具有较强的自我更新能力,对于兔脂肪组织来源干细胞,胶原酶浓度1.0 g/L、消化时间1.5 h是最佳的抉取条件.
배경:지방조직래원간세포시위우지방신질내적일충세포,구유다향분화잠능,가이정향분화성다충세포류형.목적:탐색토지방조직래원간세포체외생장특성급효원매소화괄의조건.설계、시간급지점:세포분자생물학실험,2008 05/09재해방군남경군구복주총의원비교의학과급실험과완성.재료:일본대이백토5지.Ⅰ형효원매위미국Worthington공사산품,저당DMEM/F12배양액위미국Gibco공사산품.방법:토경후부피하지방취재,채용Ⅰ효원매소화법획취세포,안Ⅰ형효원매소화질량농도분위1.0,1.5,2.0 g/L 3조,매조재안소화시간분위0.5,1,1.5 h3개아조.지방조직전쇄혼균후균분위9등분,최후중현세포종체적균정위2mL병계수,매개아조계수6차,공취5차지방조직,채용함혈청적DMEM배양액체외배양세포.주요관찰지표:세포체외생장특성병비교불동효원매농도、효원매소화시간대토지방래원간세포체외배양적영향.결과:채용1.0,1.5,2.0 g/L삼충불동효원매농도진행소화,발현재소화시간위0.5 h화1 h시,2.0 g/L조소화세포총수최다,세포총수여기타조비교.차이유현저성의의(P<0.01).재소화시간위1.5 h시,소화세포총수교0.5 h화1 h균유증가,동시,1.0,1.5,2.0 g/L조소화세포총수무통계학차이,활세포비치1.0g/L조최고,단여기타조무통계학차이,관찰제3대세포생장특성,1.0 g/L소화1.5 h조별구유경호적증식활성.결론:지방래원간세포구유교강적자아경신능력,대우토지방조직래원간세포,효원매농도1.0 g/L、소화시간1.5 h시최가적결취조건.