军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2010年
3期
255-257
,共3页
宗静%周希珍%赵慧%李晓峰%秦鄂德%高岚%秦成峰
宗靜%週希珍%趙慧%李曉峰%秦鄂德%高嵐%秦成峰
종정%주희진%조혜%리효봉%진악덕%고람%진성봉
乙型脑炎病毒%非结构蛋白NS5%病毒非结构蛋白质类%原核表达%多克隆抗体
乙型腦炎病毒%非結構蛋白NS5%病毒非結構蛋白質類%原覈錶達%多剋隆抗體
을형뇌염병독%비결구단백NS5%병독비결구단백질류%원핵표체%다극륭항체
目的 表达纯化乙型脑炎病毒非结构蛋白NS5,并制备其多克隆抗体.方法 通过PCR法扩增编码NS5蛋白的全长基因,将其克隆到原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,并通过Ni柱亲和层析纯化重组蛋白.用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c鼠制备多克隆抗体.采用间接免疫荧光法检测抗体效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果 与结论 成功获得了可溶性表达的NS5蛋白,制备了多克隆抗体,效价为1∶1000,能够特异性识别乙型脑炎病毒感染细胞中表达的NS5蛋白,为进一步研究NS5蛋白的生物学功能奠定了基础.
目的 錶達純化乙型腦炎病毒非結構蛋白NS5,併製備其多剋隆抗體.方法 通過PCR法擴增編碼NS5蛋白的全長基因,將其剋隆到原覈錶達載體pET28a中,轉化大腸桿菌BL21(DE3)進行誘導錶達,併通過Ni柱親和層析純化重組蛋白.用純化後的重組蛋白免疫BALB/c鼠製備多剋隆抗體.採用間接免疫熒光法檢測抗體效價,Western印跡鑒定抗體的特異性.結果 與結論 成功穫得瞭可溶性錶達的NS5蛋白,製備瞭多剋隆抗體,效價為1∶1000,能夠特異性識彆乙型腦炎病毒感染細胞中錶達的NS5蛋白,為進一步研究NS5蛋白的生物學功能奠定瞭基礎.
목적 표체순화을형뇌염병독비결구단백NS5,병제비기다극륭항체.방법 통과PCR법확증편마NS5단백적전장기인,장기극륭도원핵표체재체pET28a중,전화대장간균BL21(DE3)진행유도표체,병통과Ni주친화층석순화중조단백.용순화후적중조단백면역BALB/c서제비다극륭항체.채용간접면역형광법검측항체효개,Western인적감정항체적특이성.결과 여결론 성공획득료가용성표체적NS5단백,제비료다극륭항체,효개위1∶1000,능구특이성식별을형뇌염병독감염세포중표체적NS5단백,위진일보연구NS5단백적생물학공능전정료기출.
