福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
5期
501-510
,共10页
曾显成%吴异健%陈家祥%姚金水%吴宝成
曾顯成%吳異健%陳傢祥%姚金水%吳寶成
증현성%오이건%진가상%요금수%오보성
猪伪狂犬病毒%分离鉴定%FZ株%gD基因%序列分析
豬偽狂犬病毒%分離鑒定%FZ株%gD基因%序列分析
저위광견병독%분리감정%FZ주%gD기인%서렬분석
采集福州郊区病仔猪的鼻腔黏液、脑、脾脏、肾脏、淋巴结等组织病料,研磨上清接种到非洲绿猴肾(Vero)细胞和狗肾(MDCK)细胞进行病毒分离,通过对分离病毒株进行形态学、血清学、荧光抗体试验、动物接种试验、PCR试验等鉴定,确定所分离的病毒为猪伪狂犬病病毒(PRV),命名为PRV-FZ株.根据GenBank收录的PRVgD基因的序列设计—对引物,通过PCR方法扩增出约1579 bp的目的片段,并将其克隆到PCAGGS载体进行酶切鉴定、核苷酸序列测定和分析.结果表明,目的片段包含一个1203 bp的开放阅读框,编码400个氨基酸组成的多肽,与GenBank中有代表性的5株参考毒株相应基因序列比较显示,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.1％-99.8％和98.5％-99.5％.用Bioedit和TMPRED软件预测PRV-FZ gD基因的跨膜区,表明存在2处显著意义的跨膜区；用Predictprotein软件结构域预测,表明该蛋白存在2个cAMP-/cGMP-依赖蛋白激酶磷酸化位点、5个蛋白激酶C磷酸化位点、1个酪蛋白激醢Ⅱ磷酸化位点及3对二硫键.
採集福州郊區病仔豬的鼻腔黏液、腦、脾髒、腎髒、淋巴結等組織病料,研磨上清接種到非洲綠猴腎(Vero)細胞和狗腎(MDCK)細胞進行病毒分離,通過對分離病毒株進行形態學、血清學、熒光抗體試驗、動物接種試驗、PCR試驗等鑒定,確定所分離的病毒為豬偽狂犬病病毒(PRV),命名為PRV-FZ株.根據GenBank收錄的PRVgD基因的序列設計—對引物,通過PCR方法擴增齣約1579 bp的目的片段,併將其剋隆到PCAGGS載體進行酶切鑒定、覈苷痠序列測定和分析.結果錶明,目的片段包含一箇1203 bp的開放閱讀框,編碼400箇氨基痠組成的多肽,與GenBank中有代錶性的5株參攷毒株相應基因序列比較顯示,覈苷痠和氨基痠序列同源性分彆為99.1％-99.8％和98.5％-99.5％.用Bioedit和TMPRED軟件預測PRV-FZ gD基因的跨膜區,錶明存在2處顯著意義的跨膜區；用Predictprotein軟件結構域預測,錶明該蛋白存在2箇cAMP-/cGMP-依賴蛋白激酶燐痠化位點、5箇蛋白激酶C燐痠化位點、1箇酪蛋白激醢Ⅱ燐痠化位點及3對二硫鍵.
채집복주교구병자저적비강점액、뇌、비장、신장、림파결등조직병료,연마상청접충도비주록후신(Vero)세포화구신(MDCK)세포진행병독분리,통과대분리병독주진행형태학、혈청학、형광항체시험、동물접충시험、PCR시험등감정,학정소분리적병독위저위광견병병독(PRV),명명위PRV-FZ주.근거GenBank수록적PRVgD기인적서렬설계—대인물,통과PCR방법확증출약1579 bp적목적편단,병장기극륭도PCAGGS재체진행매절감정、핵감산서렬측정화분석.결과표명,목적편단포함일개1203 bp적개방열독광,편마400개안기산조성적다태,여GenBank중유대표성적5주삼고독주상응기인서렬비교현시,핵감산화안기산서렬동원성분별위99.1％-99.8％화98.5％-99.5％.용Bioedit화TMPRED연건예측PRV-FZ gD기인적과막구,표명존재2처현저의의적과막구；용Predictprotein연건결구역예측,표명해단백존재2개cAMP-/cGMP-의뢰단백격매린산화위점、5개단백격매C린산화위점、1개락단백격해Ⅱ린산화위점급3대이류건.
