分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2011年
11期
1695-1700
,共6页
谢希晖%王荣%贾正平%谢华%张爱梅%徐娟%王晓莉%王先华
謝希暉%王榮%賈正平%謝華%張愛梅%徐娟%王曉莉%王先華
사희휘%왕영%가정평%사화%장애매%서연%왕효리%왕선화
胃癌%C-myc%突变%毛细管电泳%单链构象多态性%限制性片段长度多态性
胃癌%C-myc%突變%毛細管電泳%單鏈構象多態性%限製性片段長度多態性
위암%C-myc%돌변%모세관전영%단련구상다태성%한제성편단장도다태성
癌基因C-myc激活和突变在胃癌形成过程中起着重要作用.通过毛细管电泳(CE)方法检测50例胃癌患者中C-myc基因突变,建立一种准确、快速诊断早期胃癌的方法.本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中C-myc基因第二外显子易发突变的部位基因序列,扩增样品分别经96℃变性和EcoRV酶切处理,以PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP分别对其突变情况进行检测.优化的CE检测条件:筛分介质PEO浓度3.0％,pH 8.2,电压15 kV,温度15℃；荧光检测:λex=488 nm,λem=520 nm.检测结果:C-myc基因总突变率为20.0％ (10/50).测序分析结果显示C-myc基因第二外显子第53密码子存在点突变,碱基A变为碱基T(GAT→GTT),碱基的改变使氨基酸由亮氨酸替代为谷氨酰胺.本研究数据证实C-myc基因突变与胃癌的形成紧密相关,CE检测C-myc突变基因可作为胃癌早期诊断的简便可靠的方法.
癌基因C-myc激活和突變在胃癌形成過程中起著重要作用.通過毛細管電泳(CE)方法檢測50例胃癌患者中C-myc基因突變,建立一種準確、快速診斷早期胃癌的方法.本實驗採用PCR擴增胃癌及癌徬正常組織中C-myc基因第二外顯子易髮突變的部位基因序列,擴增樣品分彆經96℃變性和EcoRV酶切處理,以PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP分彆對其突變情況進行檢測.優化的CE檢測條件:篩分介質PEO濃度3.0％,pH 8.2,電壓15 kV,溫度15℃；熒光檢測:λex=488 nm,λem=520 nm.檢測結果:C-myc基因總突變率為20.0％ (10/50).測序分析結果顯示C-myc基因第二外顯子第53密碼子存在點突變,堿基A變為堿基T(GAT→GTT),堿基的改變使氨基痠由亮氨痠替代為穀氨酰胺.本研究數據證實C-myc基因突變與胃癌的形成緊密相關,CE檢測C-myc突變基因可作為胃癌早期診斷的簡便可靠的方法.
암기인C-myc격활화돌변재위암형성과정중기착중요작용.통과모세관전영(CE)방법검측50례위암환자중C-myc기인돌변,건립일충준학、쾌속진단조기위암적방법.본실험채용PCR확증위암급암방정상조직중C-myc기인제이외현자역발돌변적부위기인서렬,확증양품분별경96℃변성화EcoRV매절처리,이PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP분별대기돌변정황진행검측.우화적CE검측조건:사분개질PEO농도3.0％,pH 8.2,전압15 kV,온도15℃；형광검측:λex=488 nm,λem=520 nm.검측결과:C-myc기인총돌변솔위20.0％ (10/50).측서분석결과현시C-myc기인제이외현자제53밀마자존재점돌변,감기A변위감기T(GAT→GTT),감기적개변사안기산유량안산체대위곡안선알.본연구수거증실C-myc기인돌변여위암적형성긴밀상관,CE검측C-myc돌변기인가작위위암조기진단적간편가고적방법.
