东北林业大学学报
東北林業大學學報
동북임업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY
2011年
11期
56-60
,共5页
侯立娟%李玉%孟丽%John A. Buswell%陈明杰%宋金俤
侯立娟%李玉%孟麗%John A. Buswell%陳明傑%宋金俤
후립연%리옥%맹려%John A. Buswell%진명걸%송금제
草菇培养料%DNA%微生物%PCR扩增
草菇培養料%DNA%微生物%PCR擴增
초고배양료%DNA%미생물%PCR확증
比较了化学裂解与酶裂解相结合法、氯化苄法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤试剂盒法和植物试剂盒法6种提取草菇培养料总DNA的方法.结果表明:不同方法的A260/A280比值有较大差异,其中化学裂解与酶裂解相结合法提取DNA的产量最高,而新型植物基因组DNA提取试剂盒提取培养料DNA的产量最低,分别为(2372.72+28.85) μg/g和(87.67+2.04) μg/g.采用真菌、细菌及放线菌特异性引物进行PCR扩增,结果表明,除氯化苄法没有扩增出目的条带外,其余方法均能扩增出目的条带,说明其均能从草菇培养料中同时有效地提取真菌、细菌和放线菌总DNA.综合评价了各方法的DNA产量、纯度、PCR扩增效果、试验时间、费用成本5个指标,其中采用化学裂解与酶裂解相结合法提取出的DNA产量最高,但所用时间较长；MP土壤试剂盒提取的DNA纯度最高、所需时间较短,但成本较高.
比較瞭化學裂解與酶裂解相結閤法、氯化芐法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤試劑盒法和植物試劑盒法6種提取草菇培養料總DNA的方法.結果錶明:不同方法的A260/A280比值有較大差異,其中化學裂解與酶裂解相結閤法提取DNA的產量最高,而新型植物基因組DNA提取試劑盒提取培養料DNA的產量最低,分彆為(2372.72+28.85) μg/g和(87.67+2.04) μg/g.採用真菌、細菌及放線菌特異性引物進行PCR擴增,結果錶明,除氯化芐法沒有擴增齣目的條帶外,其餘方法均能擴增齣目的條帶,說明其均能從草菇培養料中同時有效地提取真菌、細菌和放線菌總DNA.綜閤評價瞭各方法的DNA產量、純度、PCR擴增效果、試驗時間、費用成本5箇指標,其中採用化學裂解與酶裂解相結閤法提取齣的DNA產量最高,但所用時間較長；MP土壤試劑盒提取的DNA純度最高、所需時間較短,但成本較高.
비교료화학렬해여매렬해상결합법、록화변법、CTAB법、개량CTAB법、MP토양시제합법화식물시제합법6충제취초고배양료총DNA적방법.결과표명:불동방법적A260/A280비치유교대차이,기중화학렬해여매렬해상결합법제취DNA적산량최고,이신형식물기인조DNA제취시제합제취배양료DNA적산량최저,분별위(2372.72+28.85) μg/g화(87.67+2.04) μg/g.채용진균、세균급방선균특이성인물진행PCR확증,결과표명,제록화변법몰유확증출목적조대외,기여방법균능확증출목적조대,설명기균능종초고배양료중동시유효지제취진균、세균화방선균총DNA.종합평개료각방법적DNA산량、순도、PCR확증효과、시험시간、비용성본5개지표,기중채용화학렬해여매렬해상결합법제취출적DNA산량최고,단소용시간교장；MP토양시제합제취적DNA순도최고、소수시간교단,단성본교고.
