中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2005年
1期
23-24
,共2页
张梅%何金生%朱梅%汪红俊
張梅%何金生%硃梅%汪紅俊
장매%하금생%주매%왕홍준
重组腺病毒%AdEasy载体系统%绿色荧光蛋白
重組腺病毒%AdEasy載體繫統%綠色熒光蛋白
중조선병독%AdEasy재체계통%록색형광단백
目的对构建重组腺病毒的AdEasy载体系统的操作过程予以改进,使其更加简便、高效.方法将腺病毒骨架载体pAdEasy-1用电穿孔法转化大肠埃希菌BJ5183,获得含pAdEasy-1的大肠埃希菌BJ5183/p菌株.氯化钙法制备大肠埃希菌BJ5183/p感受态细胞,并转化含绿色荧光蛋白的穿梭载体,通过同源重组获得重组腺病毒质粒.以限制性内切酶Pac Ⅰ酶切,得到重组腺病毒DNA分子,转染293细胞.结果293细胞出现细胞病变,荧光显微镜观察有绿色荧光.结论成功获得一种以AdEasy系统为基础的简便、高效构建重组腺病毒的新方法.
目的對構建重組腺病毒的AdEasy載體繫統的操作過程予以改進,使其更加簡便、高效.方法將腺病毒骨架載體pAdEasy-1用電穿孔法轉化大腸埃希菌BJ5183,穫得含pAdEasy-1的大腸埃希菌BJ5183/p菌株.氯化鈣法製備大腸埃希菌BJ5183/p感受態細胞,併轉化含綠色熒光蛋白的穿梭載體,通過同源重組穫得重組腺病毒質粒.以限製性內切酶Pac Ⅰ酶切,得到重組腺病毒DNA分子,轉染293細胞.結果293細胞齣現細胞病變,熒光顯微鏡觀察有綠色熒光.結論成功穫得一種以AdEasy繫統為基礎的簡便、高效構建重組腺病毒的新方法.
목적대구건중조선병독적AdEasy재체계통적조작과정여이개진,사기경가간편、고효.방법장선병독골가재체pAdEasy-1용전천공법전화대장애희균BJ5183,획득함pAdEasy-1적대장애희균BJ5183/p균주.록화개법제비대장애희균BJ5183/p감수태세포,병전화함록색형광단백적천사재체,통과동원중조획득중조선병독질립.이한제성내절매Pac Ⅰ매절,득도중조선병독DNA분자,전염293세포.결과293세포출현세포병변,형광현미경관찰유록색형광.결론성공획득일충이AdEasy계통위기출적간편、고효구건중조선병독적신방법.
