广西植物
廣西植物
엄서식물
GUIHAIA
2005年
3期
237-240
,共4页
抑制消减杂交%褐飞虱%水稻
抑製消減雜交%褐飛虱%水稻
억제소감잡교%갈비슬%수도
采用抑制消减杂交方法,以褐飞虱取食32 h的水稻幼苗及未受褐飞虱取食的水稻幼苗为作为对比材料构建了消减cDNA文库,以分离水稻幼苗中褐飞虱应答基因.随机从消减cDNA文库中挑选16个白色菌落提取质粒,进行PCR扩增,发现插入片段的长度位于100～900bp之间.以在受褐飞虱取食的水稻幼苗中特异表达的基因(BpHi008A)为探针,通过斑点印迹分析发现在抑制消减后的cDNA池中,目的基因得到有效富集.利用反向总RNA斑点印迹分析和Northern杂交验证,从消减cDNA文库中筛选到了25个基因受褐飞虱取食的诱导.其中有17个克隆与编码已知功能蛋白的基因有显著的同源性,它们分别参与蛋白质的折叠与降解、蛋白质与蛋白质的相互作用及信号传递、脂类代谢、胁迫反应、物质运输和细胞生长等.总体上,参与胁迫反应和衰老的基因在褐飞虱取食后表达增强.
採用抑製消減雜交方法,以褐飛虱取食32 h的水稻幼苗及未受褐飛虱取食的水稻幼苗為作為對比材料構建瞭消減cDNA文庫,以分離水稻幼苗中褐飛虱應答基因.隨機從消減cDNA文庫中挑選16箇白色菌落提取質粒,進行PCR擴增,髮現插入片段的長度位于100～900bp之間.以在受褐飛虱取食的水稻幼苗中特異錶達的基因(BpHi008A)為探針,通過斑點印跡分析髮現在抑製消減後的cDNA池中,目的基因得到有效富集.利用反嚮總RNA斑點印跡分析和Northern雜交驗證,從消減cDNA文庫中篩選到瞭25箇基因受褐飛虱取食的誘導.其中有17箇剋隆與編碼已知功能蛋白的基因有顯著的同源性,它們分彆參與蛋白質的摺疊與降解、蛋白質與蛋白質的相互作用及信號傳遞、脂類代謝、脅迫反應、物質運輸和細胞生長等.總體上,參與脅迫反應和衰老的基因在褐飛虱取食後錶達增彊.
채용억제소감잡교방법,이갈비슬취식32 h적수도유묘급미수갈비슬취식적수도유묘위작위대비재료구건료소감cDNA문고,이분리수도유묘중갈비슬응답기인.수궤종소감cDNA문고중도선16개백색균락제취질립,진행PCR확증,발현삽입편단적장도위우100～900bp지간.이재수갈비슬취식적수도유묘중특이표체적기인(BpHi008A)위탐침,통과반점인적분석발현재억제소감후적cDNA지중,목적기인득도유효부집.이용반향총RNA반점인적분석화Northern잡교험증,종소감cDNA문고중사선도료25개기인수갈비슬취식적유도.기중유17개극륭여편마이지공능단백적기인유현저적동원성,타문분별삼여단백질적절첩여강해、단백질여단백질적상호작용급신호전체、지류대사、협박반응、물질운수화세포생장등.총체상,삼여협박반응화쇠로적기인재갈비슬취식후표체증강.
