CAJ | 학술논문

目的:通过HBV感染体外培养的人绒毛膜滋养层细胞,探讨HBV宫内感染发生的机制.方法:对人早孕绒毛膜滋养层细胞进行原代培养和对人滋养层细胞系JEG-3进行传代培养,将HBV感染血清与原代及传代培养细胞共同孵育8-48 h,倒置显微镜观察细胞形态及细胞间连接,细胞免疫荧光和免疫组织化学染色方法检测滋养层细胞中HBsAg和HBcAg的表达,荧光定量PCR方法检测被感染的滋养层细胞中的HBV DNA,TUNEL方法检测滋养层细胞的凋亡.结果:与HBV阳性血清共同孵育对滋养层细胞的形态和细胞间连接无明显影响;细胞免疫荧光和免疫组织化学染色结果显示,滋养层细胞与HBV感染血清共同孵育(8,24,48 h)后,滋养层细胞可以出现HBsAg和HBcAg的阳性表达,24 h时HB sAg阳性细胞数量最多(8 h:18.0%±3.67%;24 h:30.6%±2.88%;48h:24.8%±4.21%);荧光定量PCR方法检测到被感染的滋养层细胞中HBV DNA的存在;TUNEL结果显示,与HBV感染血清共同孵育可导致滋养层凋亡细胞数量逐渐增加(24 h:18.6%±3.05%;48 h:26.8%±2.86%;P＜0.01).结论:滋养层细胞的感染可能是HBV通过胎盘屏障的途径之一;HBV感染可以诱导滋养层细胞产生凋亡,这可能是胎盘屏障阻止HBV宫内感染的一种保护性机制.
목적:통과HBV감염체외배양적인융모막자양층세포,탐토HBV궁내감염발생적궤제.방법:대인조잉융모막자양층세포진행원대배양화대인자양층세포계JEG-3진행전대배양,장HBV감염혈청여원대급전대배양세포공동부육8-48 h,도치현미경관찰세포형태급세포간련접,세포면역형광화면역조직화학염색방법검측자양층세포중HBsAg화HBcAg적표체,형광정량PCR방법검측피감염적자양층세포중적HBV DNA,TUNEL방법검측자양층세포적조망.결과:여HBV양성혈청공동부육대자양층세포적형태화세포간련접무명현영향;세포면역형광화면역조직화학염색결과현시,자양층세포여HBV감염혈청공동부육(8,24,48 h)후,자양층세포가이출현HBsAg화HBcAg적양성표체,24 h시HB sAg양성세포수량최다(8 h:18.0%±3.67%;24 h:30.6%±2.88%;48h:24.8%±4.21%);형광정량PCR방법검측도피감염적자양층세포중HBV DNA적존재;TUNEL결과현시,여HBV감염혈청공동부육가도치자양층조망세포수량축점증가(24 h:18.6%±3.05%;48 h:26.8%±2.86%;P＜0.01).결론:자양층세포적감염가능시HBV통과태반병장적도경지일;HBV감염가이유도자양층세포산생조망,저가능시태반병장조지HBV궁내감염적일충보호성궤제.