实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2011年
6期
938-941
,共4页
沙玉根%赵非%张爱华%黄松明
沙玉根%趙非%張愛華%黃鬆明
사옥근%조비%장애화%황송명
足细胞%HEK293细胞%NPHS2%表达载体%基因重组
足細胞%HEK293細胞%NPHS2%錶達載體%基因重組
족세포%HEK293세포%NPHS2%표체재체%기인중조
目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达.方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin.结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin.结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用.
目的:構建人pEGFP-C2-NPHS2錶達載體,併觀察其在人胚胎腎(HEK)293細胞中的錶達.方法:應用基因重組技術,構建增彊綠色熒光蛋白與NPHS2的融閤錶達載體,經PCR、限製性內切酶酶切和測序鑒定,應用基因轉染技術將其轉入HEK293細胞中,熒光顯微鏡和免疫印跡檢測NPHS2的錶達產物podocin.結果:經鑒定目的基因NPHS2全長插入重組質粒,HEK293細胞不錶達NPHS2基因,轉染後可以檢測到綠色熒光蛋白分佈于細胞的膜週部,免疫印跡證實為編碼蛋白podocin.結論:成功構建重組人pEGFP-C2-NPHS2錶達載體,有助于進一步研究podocin在足細胞疾病中的作用.
목적:구건인pEGFP-C2-NPHS2표체재체,병관찰기재인배태신(HEK)293세포중적표체.방법:응용기인중조기술,구건증강록색형광단백여NPHS2적융합표체재체,경PCR、한제성내절매매절화측서감정,응용기인전염기술장기전입HEK293세포중,형광현미경화면역인적검측NPHS2적표체산물podocin.결과:경감정목적기인NPHS2전장삽입중조질립,HEK293세포불표체NPHS2기인,전염후가이검측도록색형광단백분포우세포적막주부,면역인적증실위편마단백podocin.결론:성공구건중조인pEGFP-C2-NPHS2표체재체,유조우진일보연구podocin재족세포질병중적작용.
