CAJ | 학술논문

背景与目的:组蛋白乙酰化状态受组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)和组蛋白乙酰化酶(histone acetyltransferases,HATs)调节,进而调控基因转录.HDACs和HATs失衡是肿瘤发生发展的重要分子机制.组蛋白去乙酰化酶5(histone deacetylase 5,HDAC5)在多数肿瘤中表达降低,然而其在非小细胞肺癌细胞迁移中的作用尚未见报道.本研究旨在检测HDAC5基因在非小细胞肺癌中的差异性表达,研究HDAC5基因过表达对肺腺痛NCI-H1299细胞迁移的影响.方法:采用real time RT-PCR、Western blot检测28例非小细胞肺癌手术标本中HDAC5 mRNA和蛋白表达;将野生型HDAC5(HDAC5wt)基因转染到NCI-H1299细胞中,将细胞分为转染HDAC5wt基因的实验组(HDAC5wt)、未转染任何质粒的正常对照组(control)、转染空质粒的阴性对照组(vector).通过MTT方法比较3组细胞的生长情况;利用划痕、Transwell方法检测HDAC5基因过表达对细胞迁移能力的影响.结果:对照组相比,约71.4%(20/28)非小细胞肺癌患者手术标本中HDAC5 mRNA和蛋白表达明显降低;MTT结果显示在第2～5天,实验组D490值显著性低于正常对照组及阴性对照组,而在24 h时,3组细胞增殖差异无统计学意义;Transwell迁移实验结果显示实验组跨膜细胞的数目为158.3±19.4,较正常对照组(247.0±12.1)及阴性对照组(236.0±14.9)均显著减少(P<0.05);划痕实验结果显示HDAC5基因过表达后,H1299细胞划痕愈合程度明显降低.结论:HDAC5基因在非小细胞肺癌中低表达;体外过表达HDAC5基因可抑制NCI-H1299细胞迁移.
배경여목적:조단백을선화상태수조단백거을선화매(histone deacetylases,HDACs)화조단백을선화매(histone acetyltransferases,HATs)조절,진이조공기인전록.HDACs화HATs실형시종류발생발전적중요분자궤제.조단백거을선화매5(histone deacetylase 5,HDAC5)재다수종류중표체강저,연이기재비소세포폐암세포천이중적작용상미견보도.본연구지재검측HDAC5기인재비소세포폐암중적차이성표체,연구HDAC5기인과표체대폐선통NCI-H1299세포천이적영향.방법:채용real time RT-PCR、Western blot검측28례비소세포폐암수술표본중HDAC5 mRNA화단백표체;장야생형HDAC5(HDAC5wt)기인전염도NCI-H1299세포중,장세포분위전염HDAC5wt기인적실험조(HDAC5wt)、미전염임하질립적정상대조조(control)、전염공질립적음성대조조(vector).통과MTT방법비교3조세포적생장정황;이용화흔、Transwell방법검측HDAC5기인과표체대세포천이능력적영향.결과:대조조상비,약71.4%(20/28)비소세포폐암환자수술표본중HDAC5 mRNA화단백표체명현강저;MTT결과현시재제2～5천,실험조D490치현저성저우정상대조조급음성대조조,이재24 h시,3조세포증식차이무통계학의의;Transwell천이실험결과현시실험조과막세포적수목위158.3±19.4,교정상대조조(247.0±12.1)급음성대조조(236.0±14.9)균현저감소(P<0.05);화흔실험결과현시HDAC5기인과표체후,H1299세포화흔유합정도명현강저.결론:HDAC5기인재비소세포폐암중저표체;체외과표체HDAC5기인가억제NCI-H1299세포천이.