中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
10期
81-85
,共5页
廖德芳%信爱国%高华峰%苗海生%高林%朱明旺%李华春
廖德芳%信愛國%高華峰%苗海生%高林%硃明旺%李華春
료덕방%신애국%고화봉%묘해생%고림%주명왕%리화춘
口蹄疫病毒%P1基因%重组杆状病毒%表达
口蹄疫病毒%P1基因%重組桿狀病毒%錶達
구제역병독%P1기인%중조간상병독%표체
设计合成特异引物,扩增O型口蹄疫病毒(O/FMDV)P1-2A基因,将其克隆至T载体上,通过HindⅢ和Not Ⅰ双酶切P1-2A基因和真核转座载体pFastBacTMDual,构建重组转座质粒pFastBac-P12A,再将pFastBac-P12A转化人含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac,经重组筛选获得杆状病毒重组质粒Bacmid-P12A.将Bacmid-P12A质粒转染Sf9昆虫细胞,出现典型CPE.病变细胞经Dot blotting和SDS-PAGE检测和分析,结果表明,O/FMDV P1-2A蛋白在Sf9细胞中获得表达,为O型FMDV特异性蛋白.
設計閤成特異引物,擴增O型口蹄疫病毒(O/FMDV)P1-2A基因,將其剋隆至T載體上,通過HindⅢ和Not Ⅰ雙酶切P1-2A基因和真覈轉座載體pFastBacTMDual,構建重組轉座質粒pFastBac-P12A,再將pFastBac-P12A轉化人含穿梭載體Bacmid的受體菌DH10Bac,經重組篩選穫得桿狀病毒重組質粒Bacmid-P12A.將Bacmid-P12A質粒轉染Sf9昆蟲細胞,齣現典型CPE.病變細胞經Dot blotting和SDS-PAGE檢測和分析,結果錶明,O/FMDV P1-2A蛋白在Sf9細胞中穫得錶達,為O型FMDV特異性蛋白.
설계합성특이인물,확증O형구제역병독(O/FMDV)P1-2A기인,장기극륭지T재체상,통과HindⅢ화Not Ⅰ쌍매절P1-2A기인화진핵전좌재체pFastBacTMDual,구건중조전좌질립pFastBac-P12A,재장pFastBac-P12A전화인함천사재체Bacmid적수체균DH10Bac,경중조사선획득간상병독중조질립Bacmid-P12A.장Bacmid-P12A질립전염Sf9곤충세포,출현전형CPE.병변세포경Dot blotting화SDS-PAGE검측화분석,결과표명,O/FMDV P1-2A단백재Sf9세포중획득표체,위O형FMDV특이성단백.
