食用菌学报
食用菌學報
식용균학보
ACTA EDULIS FUNGI
2012年
1期
13-16
,共4页
孙晓红%汪虹%杨晓达%冯爱萍%陈明杰%潘迎捷
孫曉紅%汪虹%楊曉達%馮愛萍%陳明傑%潘迎捷
손효홍%왕홍%양효체%풍애평%진명걸%반영첩
S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因%草菇%冷诱导基因
S-腺苷同型半胱氨痠水解酶基因%草菇%冷誘導基因
S-선감동형반광안산수해매기인%초고%랭유도기인
将草菇(Volvariella volvacea)冷诱导基因Cor3 cDNA序列经EcoR I酶切克隆到原核表达载体pPROK-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达、分离纯化发现该蛋白的分子量约为43 kD,等电聚焦电泳结果表明,该蛋白的等电点为6.1,HPLC检测说明合成方向的酶活性为每毫克蛋白每分钟4.5 μmol,DNTB与同型半胱氨酸颜色反应测定水解方向的酶活性为每毫克蛋白每分钟0.7 μmol,根据上述特性可以确定草菇冷诱导基因Cor3所编码的蛋白是S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH).
將草菇(Volvariella volvacea)冷誘導基因Cor3 cDNA序列經EcoR I酶切剋隆到原覈錶達載體pPROK-1中,轉化大腸桿菌(Escherichia coli)JM109,經異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導錶達、分離純化髮現該蛋白的分子量約為43 kD,等電聚焦電泳結果錶明,該蛋白的等電點為6.1,HPLC檢測說明閤成方嚮的酶活性為每毫剋蛋白每分鐘4.5 μmol,DNTB與同型半胱氨痠顏色反應測定水解方嚮的酶活性為每毫剋蛋白每分鐘0.7 μmol,根據上述特性可以確定草菇冷誘導基因Cor3所編碼的蛋白是S-腺苷同型半胱氨痠水解酶(SAHH).
장초고(Volvariella volvacea)랭유도기인Cor3 cDNA서렬경EcoR I매절극륭도원핵표체재체pPROK-1중,전화대장간균(Escherichia coli)JM109,경이병기-β-D-류대필남반유당감(IPTG)유도표체、분리순화발현해단백적분자량약위43 kD,등전취초전영결과표명,해단백적등전점위6.1,HPLC검측설명합성방향적매활성위매호극단백매분종4.5 μmol,DNTB여동형반광안산안색반응측정수해방향적매활성위매호극단백매분종0.7 μmol,근거상술특성가이학정초고랭유도기인Cor3소편마적단백시S-선감동형반광안산수해매(SAHH).
