西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
8期
1505-1510
,共6页
梅花%CBF转录因子%RT-qPCR
梅花%CBF轉錄因子%RT-qPCR
매화%CBF전록인자%RT-qPCR
根据GenBank中与梅花同属的桃、甜樱桃等已发表CBFs转录因子序列设计简并引物,采用PCR和RTPCR方法,从梅花基因组DNA和cDNA中克隆CBF转录因子片段.结果表明,两种途径获得的CBF基因序列一致,基因全长821 bp,编码238个氨基酸,其氨基酸序列具有典型的CBF蛋白特征,包含保守的AP2/EREB DNA 结合结构域及CBF家族蛋白特征短多肽序列(PKK/RPAGRxKFxETRHP和DSAWR).氨基酸相似性分析结果表明,该基因与欧洲甜樱桃、矮扁桃等CBF转录因子相似性较高.相对荧光定量PCR结果显示,4℃低温胁迫下,其表达量符合CBF转录因子表达特点,随着胁迫时间的增长表达量呈上升趋势,8h时达峰值,说明该基因在低温胁迫下上调表达.
根據GenBank中與梅花同屬的桃、甜櫻桃等已髮錶CBFs轉錄因子序列設計簡併引物,採用PCR和RTPCR方法,從梅花基因組DNA和cDNA中剋隆CBF轉錄因子片段.結果錶明,兩種途徑穫得的CBF基因序列一緻,基因全長821 bp,編碼238箇氨基痠,其氨基痠序列具有典型的CBF蛋白特徵,包含保守的AP2/EREB DNA 結閤結構域及CBF傢族蛋白特徵短多肽序列(PKK/RPAGRxKFxETRHP和DSAWR).氨基痠相似性分析結果錶明,該基因與歐洲甜櫻桃、矮扁桃等CBF轉錄因子相似性較高.相對熒光定量PCR結果顯示,4℃低溫脅迫下,其錶達量符閤CBF轉錄因子錶達特點,隨著脅迫時間的增長錶達量呈上升趨勢,8h時達峰值,說明該基因在低溫脅迫下上調錶達.
근거GenBank중여매화동속적도、첨앵도등이발표CBFs전록인자서렬설계간병인물,채용PCR화RTPCR방법,종매화기인조DNA화cDNA중극륭CBF전록인자편단.결과표명,량충도경획득적CBF기인서렬일치,기인전장821 bp,편마238개안기산,기안기산서렬구유전형적CBF단백특정,포함보수적AP2/EREB DNA 결합결구역급CBF가족단백특정단다태서렬(PKK/RPAGRxKFxETRHP화DSAWR).안기산상사성분석결과표명,해기인여구주첨앵도、왜편도등CBF전록인자상사성교고.상대형광정량PCR결과현시,4℃저온협박하,기표체량부합CBF전록인자표체특점,수착협박시간적증장표체량정상승추세,8h시체봉치,설명해기인재저온협박하상조표체.
