复旦学报(自然科学版)
複旦學報(自然科學版)
복단학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2002年
1期
47-51
,共5页
林丽珠%唐炯%喻红%黄莉%赵寿元%李昌本
林麗珠%唐炯%喻紅%黃莉%趙壽元%李昌本
림려주%당형%유홍%황리%조수원%리창본
TNFa基因%调控%绿色荧光蛋白%L929细胞
TNFa基因%調控%綠色熒光蛋白%L929細胞
TNFa기인%조공%록색형광단백%L929세포
质粒pEGFP-1是一种不含启动子序列的哺乳动物细胞表达载体.将系列缺失的TNFα基因启动子、5′UTR(unt髓nslat甜region)和3′UTR插人pEGFP-1中,构建了一组重组质粒转染L929细胞后,发现当报告基因EGFP的上游含有包括5′UTR在内的TNn基因启动子序列时,重组质粒在L929细胞中均能表达EGFP.但是,当EGFP基因3′端同时含有TNFa基因的3′UTR时,重组质粒转染L929细胞后,均不能表达EGFP因此,在L929细胞中,TNFα基因的3′UTR对基因表达具有抑制作用.进一步研究发现,在L929细胞中,TNFa基因的3′UTR对基因表达的抑制作用需要其5′UTR的共同参与,而且,RT-PCR实验表明,LPS在其他细胞中对TN&表达起诱导作用的机制在L929细胞中不存在.
質粒pEGFP-1是一種不含啟動子序列的哺乳動物細胞錶達載體.將繫列缺失的TNFα基因啟動子、5′UTR(unt髓nslat甜region)和3′UTR插人pEGFP-1中,構建瞭一組重組質粒轉染L929細胞後,髮現噹報告基因EGFP的上遊含有包括5′UTR在內的TNn基因啟動子序列時,重組質粒在L929細胞中均能錶達EGFP.但是,噹EGFP基因3′耑同時含有TNFa基因的3′UTR時,重組質粒轉染L929細胞後,均不能錶達EGFP因此,在L929細胞中,TNFα基因的3′UTR對基因錶達具有抑製作用.進一步研究髮現,在L929細胞中,TNFa基因的3′UTR對基因錶達的抑製作用需要其5′UTR的共同參與,而且,RT-PCR實驗錶明,LPS在其他細胞中對TN&錶達起誘導作用的機製在L929細胞中不存在.
질립pEGFP-1시일충불함계동자서렬적포유동물세포표체재체.장계렬결실적TNFα기인계동자、5′UTR(unt수nslat첨region)화3′UTR삽인pEGFP-1중,구건료일조중조질립전염L929세포후,발현당보고기인EGFP적상유함유포괄5′UTR재내적TNn기인계동자서렬시,중조질립재L929세포중균능표체EGFP.단시,당EGFP기인3′단동시함유TNFa기인적3′UTR시,중조질립전염L929세포후,균불능표체EGFP인차,재L929세포중,TNFα기인적3′UTR대기인표체구유억제작용.진일보연구발현,재L929세포중,TNFa기인적3′UTR대기인표체적억제작용수요기5′UTR적공동삼여,이차,RT-PCR실험표명,LPS재기타세포중대TN&표체기유도작용적궤제재L929세포중불존재.
