基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2006年
12期
1328-1331
,共4页
余跃%杜烨玮%贺晶%孙仁宇%王士雯
餘躍%杜燁瑋%賀晶%孫仁宇%王士雯
여약%두엽위%하정%손인우%왕사문
急性肺损伤%脂多糖%核因子-κB%丝裂素活化蛋白激酶
急性肺損傷%脂多糖%覈因子-κB%絲裂素活化蛋白激酶
급성폐손상%지다당%핵인자-κB%사렬소활화단백격매
目的 观察MAPK和NF-κB在经脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)Toll-like受体4(TLR4)表达增强中的作用.方法 分离培养PMVECs.不同浓度的LPS与PMVECs共培养2 h,或与LPS(100 μg/L)作用不同时间.用ELISA法检测培养上清液中TNF-α含量.分别用ERK抑制剂PD98059和P38MAPK抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC进行干预.用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4和TNF-αmRNA.用Western-blot检测ERK/P38 MAPK和核蛋白NF-κB的表达.结果 在LPS浓度为50～500μg/L时,作用于PMVECs 2 h,或LPS 100 μg/L作用不同时间时,培养上清液中TNF-α含量呈剂量和时间依赖性显著增加(P＜0.01).PMVECs表达TNF-α及TLR4 mRNA增加,6 h时达高峰.分别用上述抑制剂均可缓解上述变化,而同时联合使用PD98059和SB203580则进一步增强该抑制作用.上述抑制剂分别缓解LPS诱导的PMVECs表达ERK/P38 MAPK和NF-κB蛋白增强.结论 MAPK和NF-κB上调给脂多糖诱导的小鼠PMVECs TLR4的表达.
目的 觀察MAPK和NF-κB在經脂多糖(LPS)誘導的小鼠肺微血管內皮細胞(PMVECs)Toll-like受體4(TLR4)錶達增彊中的作用.方法 分離培養PMVECs.不同濃度的LPS與PMVECs共培養2 h,或與LPS(100 μg/L)作用不同時間.用ELISA法檢測培養上清液中TNF-α含量.分彆用ERK抑製劑PD98059和P38MAPK抑製劑SB203580或NF-κB抑製劑PDTC進行榦預.用反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測TLR4和TNF-αmRNA.用Western-blot檢測ERK/P38 MAPK和覈蛋白NF-κB的錶達.結果 在LPS濃度為50～500μg/L時,作用于PMVECs 2 h,或LPS 100 μg/L作用不同時間時,培養上清液中TNF-α含量呈劑量和時間依賴性顯著增加(P＜0.01).PMVECs錶達TNF-α及TLR4 mRNA增加,6 h時達高峰.分彆用上述抑製劑均可緩解上述變化,而同時聯閤使用PD98059和SB203580則進一步增彊該抑製作用.上述抑製劑分彆緩解LPS誘導的PMVECs錶達ERK/P38 MAPK和NF-κB蛋白增彊.結論 MAPK和NF-κB上調給脂多糖誘導的小鼠PMVECs TLR4的錶達.
목적 관찰MAPK화NF-κB재경지다당(LPS)유도적소서폐미혈관내피세포(PMVECs)Toll-like수체4(TLR4)표체증강중적작용.방법 분리배양PMVECs.불동농도적LPS여PMVECs공배양2 h,혹여LPS(100 μg/L)작용불동시간.용ELISA법검측배양상청액중TNF-α함량.분별용ERK억제제PD98059화P38MAPK억제제SB203580혹NF-κB억제제PDTC진행간예.용반전록취합매련반응(RT-PCR)검측TLR4화TNF-αmRNA.용Western-blot검측ERK/P38 MAPK화핵단백NF-κB적표체.결과 재LPS농도위50～500μg/L시,작용우PMVECs 2 h,혹LPS 100 μg/L작용불동시간시,배양상청액중TNF-α함량정제량화시간의뢰성현저증가(P＜0.01).PMVECs표체TNF-α급TLR4 mRNA증가,6 h시체고봉.분별용상술억제제균가완해상술변화,이동시연합사용PD98059화SB203580칙진일보증강해억제작용.상술억제제분별완해LPS유도적PMVECs표체ERK/P38 MAPK화NF-κB단백증강.결론 MAPK화NF-κB상조급지다당유도적소서PMVECs TLR4적표체.
