安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
19期
8011-8013
,共3页
丽格海棠%CYcD2基因%遗传转化%农杆菌介导法
麗格海棠%CYcD2基因%遺傳轉化%農桿菌介導法
려격해당%CYcD2기인%유전전화%농간균개도법
[目的]改变丽格海棠的开花时间,为丽格海棠分子育种奠定基础.[方法]以丽格海棠叶片为外植体,利用液氮直接转化法将pB1121-CYcD2转入根癌农杆菌EHA52中,再通过农杆菌介导法将CYcD2基因导入丽格海棠中.[结果]选择100 mg/L的卡那霉素作为转化外植体的起始选择压力.将经农杆菌共培养及过渡培养后的材料转入筛选培养基中,60 d后获得15个不定芽,再在生根培养基中培养20 d后,全部生根.PCR检测发现,15株卡那霉素抗性植株中有6株表现出与阳性对照相同的特异性条带,剩余植株为假转化体.Southern杂交分析表明6个转化植株中有5个出现了杂交信号,即为转基因植株,仅有1个为假阳性.[结论]该研究已成功地将外源基因CYcD2转入丽格海棠受体中.
[目的]改變麗格海棠的開花時間,為麗格海棠分子育種奠定基礎.[方法]以麗格海棠葉片為外植體,利用液氮直接轉化法將pB1121-CYcD2轉入根癌農桿菌EHA52中,再通過農桿菌介導法將CYcD2基因導入麗格海棠中.[結果]選擇100 mg/L的卡那黴素作為轉化外植體的起始選擇壓力.將經農桿菌共培養及過渡培養後的材料轉入篩選培養基中,60 d後穫得15箇不定芽,再在生根培養基中培養20 d後,全部生根.PCR檢測髮現,15株卡那黴素抗性植株中有6株錶現齣與暘性對照相同的特異性條帶,剩餘植株為假轉化體.Southern雜交分析錶明6箇轉化植株中有5箇齣現瞭雜交信號,即為轉基因植株,僅有1箇為假暘性.[結論]該研究已成功地將外源基因CYcD2轉入麗格海棠受體中.
[목적]개변려격해당적개화시간,위려격해당분자육충전정기출.[방법]이려격해당협편위외식체,이용액담직접전화법장pB1121-CYcD2전입근암농간균EHA52중,재통과농간균개도법장CYcD2기인도입려격해당중.[결과]선택100 mg/L적잡나매소작위전화외식체적기시선택압력.장경농간균공배양급과도배양후적재료전입사선배양기중,60 d후획득15개불정아,재재생근배양기중배양20 d후,전부생근.PCR검측발현,15주잡나매소항성식주중유6주표현출여양성대조상동적특이성조대,잉여식주위가전화체.Southern잡교분석표명6개전화식주중유5개출현료잡교신호,즉위전기인식주,부유1개위가양성.[결론]해연구이성공지장외원기인CYcD2전입려격해당수체중.
