暨南大学学报（自然科学与医学版）
暨南大學學報（自然科學與醫學版）
기남대학학보（자연과학여의학판）
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）
2008年
5期
516-521
,共6页
袁嘉恩%许忠能%雷腊梅%李慕婵%韩博平%谢数涛
袁嘉恩%許忠能%雷臘梅%李慕嬋%韓博平%謝數濤
원가은%허충능%뢰석매%리모선%한박평%사수도
Hsp70基因%cDNA末端快速扩增%逆转录聚合酶链反应%中华绒螯蟹
Hsp70基因%cDNA末耑快速擴增%逆轉錄聚閤酶鏈反應%中華絨螯蟹
Hsp70기인%cDNA말단쾌속확증%역전록취합매련반응%중화융오해
采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆中华绒螯蟹(Edocheirsinensis)的Hsp70基因并进行序列分析.以中华绒螯蟹卵组织cDNA为模板,克隆测序后拼接得到一条长2 429 bp的cDNA序列,序列分析表明其覆盖了完整编码区,编码649个氨基酸.经antheprot分析发现2个Hsp70基因的签名序列:IFDLGGGTFDVSIL,IVLVGGSTRIPKIQK;Dnak特征基序DLGTF-S-V;非细胞器基序:RARFEEL;核定位信号标签:KKDPSESKRALRRL;胞质Hsp70特征基序GPTIEEVD.经BLASTn和BLASTx软件分析,该编码区核苷酸序列与凡纳滨对虾(Litopenaeus uannamei)、斑节对虾(Penaeus monodon)的相似性分别为85.30%和84.89%.根据核苷酸序列所推导出的Hsp70氨基酸序列,其与斑节对虾、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)的相似性分别为93.23%和93.40%.本研究克隆了中华绒螯蟹的Hsp70基因,为进一步深入研究锯缘青蟹的抗逆机理及其遗传改良奠定了基础.
採用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)及cDNA末耑快速擴增(RACE)技術剋隆中華絨螯蟹(Edocheirsinensis)的Hsp70基因併進行序列分析.以中華絨螯蟹卵組織cDNA為模闆,剋隆測序後拼接得到一條長2 429 bp的cDNA序列,序列分析錶明其覆蓋瞭完整編碼區,編碼649箇氨基痠.經antheprot分析髮現2箇Hsp70基因的籤名序列:IFDLGGGTFDVSIL,IVLVGGSTRIPKIQK;Dnak特徵基序DLGTF-S-V;非細胞器基序:RARFEEL;覈定位信號標籤:KKDPSESKRALRRL;胞質Hsp70特徵基序GPTIEEVD.經BLASTn和BLASTx軟件分析,該編碼區覈苷痠序列與凡納濱對蝦(Litopenaeus uannamei)、斑節對蝦(Penaeus monodon)的相似性分彆為85.30%和84.89%.根據覈苷痠序列所推導齣的Hsp70氨基痠序列,其與斑節對蝦、囉氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii)的相似性分彆為93.23%和93.40%.本研究剋隆瞭中華絨螯蟹的Hsp70基因,為進一步深入研究鋸緣青蟹的抗逆機理及其遺傳改良奠定瞭基礎.
채용역전록취합매련반응(RT-PCR)급cDNA말단쾌속확증(RACE)기술극륭중화융오해(Edocheirsinensis)적Hsp70기인병진행서렬분석.이중화융오해란조직cDNA위모판,극륭측서후병접득도일조장2 429 bp적cDNA서렬,서렬분석표명기복개료완정편마구,편마649개안기산.경antheprot분석발현2개Hsp70기인적첨명서렬:IFDLGGGTFDVSIL,IVLVGGSTRIPKIQK;Dnak특정기서DLGTF-S-V;비세포기기서:RARFEEL;핵정위신호표첨:KKDPSESKRALRRL;포질Hsp70특정기서GPTIEEVD.경BLASTn화BLASTx연건분석,해편마구핵감산서렬여범납빈대하(Litopenaeus uannamei)、반절대하(Penaeus monodon)적상사성분별위85.30%화84.89%.근거핵감산서렬소추도출적Hsp70안기산서렬,기여반절대하、라씨소하(Macrobrachium rosenbergii)적상사성분별위93.23%화93.40%.본연구극륭료중화융오해적Hsp70기인,위진일보심입연구거연청해적항역궤리급기유전개량전정료기출.
