西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2009年
3期
107-110,140
,共5页
李君武%宋东%王珊珊%胡建广%刘艳%黄清华
李君武%宋東%王珊珊%鬍建廣%劉豔%黃清華
리군무%송동%왕산산%호건엄%류염%황청화
结核分支杆菌%Esat-6%Globulin-1
結覈分支桿菌%Esat-6%Globulin-1
결핵분지간균%Esat-6%Globulin-1
以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Esat-6基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上,将globulin-1-Esat6联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中,构建植物双元表达质粒pCAMBIA1300GEsat-6,电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中.通过对pC1300GEsat-6质粒酶切鉴定和测序分析表明克隆的Esat-6与预期相符,酶切从农杆菌中所提的质粒,条带大小与预期结果相符合.
以本實驗室構建的pEGHLE為模闆經聚閤酶鏈反應(PCR)擴增齣Esat-6基因,連接到含有玉米特異性啟動子globulin-1的pCR2.1載體上,將globulin-1-Esat6聯閤片斷切下連到含有抗除草劑基因bar的pCAMBIA1300載體中,構建植物雙元錶達質粒pCAMBIA1300GEsat-6,電擊法將重組質粒轉化到農桿菌LBA4404中.通過對pC1300GEsat-6質粒酶切鑒定和測序分析錶明剋隆的Esat-6與預期相符,酶切從農桿菌中所提的質粒,條帶大小與預期結果相符閤.
이본실험실구건적pEGHLE위모판경취합매련반응(PCR)확증출Esat-6기인,련접도함유옥미특이성계동자globulin-1적pCR2.1재체상,장globulin-1-Esat6연합편단절하련도함유항제초제기인bar적pCAMBIA1300재체중,구건식물쌍원표체질립pCAMBIA1300GEsat-6,전격법장중조질립전화도농간균LBA4404중.통과대pC1300GEsat-6질립매절감정화측서분석표명극륭적Esat-6여예기상부,매절종농간균중소제적질립,조대대소여예기결과상부합.
