广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
17期
138-142
,共5页
李璟%兰贵红%张飞伟%乔代蓉%曹毅
李璟%蘭貴紅%張飛偉%喬代蓉%曹毅
리경%란귀홍%장비위%교대용%조의
枯草芽孢杆菌%脂肪酶%16S rDNA%生物柴油%GC/MS
枯草芽孢桿菌%脂肪酶%16S rDNA%生物柴油%GC/MS
고초아포간균%지방매%16S rDNA%생물시유%GC/MS
以橄榄油为唯一碳源对富含油污土壤中产脂肪酶微生物进行富集培养,以溴甲酚紫为指示剂进行初筛,结合橄榄油乳化液滴定法测定酶活力,得到酶活力较高的产脂肪酶菌株Y19,其粗酶活力为16.88 U/mL,经16S rDNA初步鉴定为枯草芽孢杆菌.通过特定引物PCR扩增菌株Y19脂肪酶lipA基因,构建pET32a-lipA重组表达载体并在大肠杆菌中诱导表达.以表达菌的细胞裂解物进行生物柴油转酯试验,GC/MS结果显示,重组脂肪酶lipA粗酶液催化的转酯产物中脂肪酸甲酯成分与生物柴油十分相近.
以橄欖油為唯一碳源對富含油汙土壤中產脂肪酶微生物進行富集培養,以溴甲酚紫為指示劑進行初篩,結閤橄欖油乳化液滴定法測定酶活力,得到酶活力較高的產脂肪酶菌株Y19,其粗酶活力為16.88 U/mL,經16S rDNA初步鑒定為枯草芽孢桿菌.通過特定引物PCR擴增菌株Y19脂肪酶lipA基因,構建pET32a-lipA重組錶達載體併在大腸桿菌中誘導錶達.以錶達菌的細胞裂解物進行生物柴油轉酯試驗,GC/MS結果顯示,重組脂肪酶lipA粗酶液催化的轉酯產物中脂肪痠甲酯成分與生物柴油十分相近.
이감람유위유일탄원대부함유오토양중산지방매미생물진행부집배양,이추갑분자위지시제진행초사,결합감람유유화액적정법측정매활력,득도매활력교고적산지방매균주Y19,기조매활력위16.88 U/mL,경16S rDNA초보감정위고초아포간균.통과특정인물PCR확증균주Y19지방매lipA기인,구건pET32a-lipA중조표체재체병재대장간균중유도표체.이표체균적세포렬해물진행생물시유전지시험,GC/MS결과현시,중조지방매lipA조매액최화적전지산물중지방산갑지성분여생물시유십분상근.
