中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2006年
2期
72-76
,共5页
高艾%刘秉慈%黄传书%史香林%贾效伟%尤宝荣%叶萌
高艾%劉秉慈%黃傳書%史香林%賈效偉%尤寶榮%葉萌
고애%류병자%황전서%사향림%가효위%우보영%협맹
苯并(a)芘%活化蛋白-1%细胞周期
苯併(a)芘%活化蛋白-1%細胞週期
분병(a)비%활화단백-1%세포주기
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/转录因子活化蛋白-1(AP-1)信号通路在调控苯并(a)芘[B(a)P]致人胚肺成纤维细胞(HELF)周期改变中的作用.方法用AP-1荧光素酶报告基因技术检测AP-1荧光素酶活力,流式细胞术测定细胞周期时相分布,免疫印迹法检测MAPK[包括细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38激酶]总量及磷酸化水平,用MAPK显性失活突变体(DN)(DN-ERK2、DN-JNK1和DN-p38)证明通路的上下游关系.结果 2μmol/L B(a)P分别处理细胞0、6、12、24 h,AP-1活力在12 h达峰值,是对照组的2.22倍,差异有统计学意义(P＜0.05);ERK1/2、JNK1/2和p38蛋白激酶的磷酸化水平明显提高,分别是对照组的2.5、14.0和2.1倍;B(a)P处理组S期细胞比例(50.2%±4.6%)与对照组(16.7%±8.1%)相比明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01);ERK2和JNK1显性失活突变体的过表达均可明显降低B(a)P诱导的AP-1活力增强,并且明显降低B(a)P处理组S期细胞比例(分别为33.3%±1.7%,30.8%±3.9%),差异均有统计学意义(P＜0.05);p38显性失活突变体的过表达对B(a)P引起的AP-1活力增强及S期细胞比例增加无影响.AP-1化学抑制剂姜黄素(20μmol/L)可明显降低B(a)P引起的S期细胞比例增加(13.6%±2.9%),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ERK和JNK通过活化AP-1介导B(a)P诱导的细胞周期改变;而B(a)P诱导的AP-1活力增强及细胞周期改变与p38无关.
目的探討絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)/轉錄因子活化蛋白-1(AP-1)信號通路在調控苯併(a)芘[B(a)P]緻人胚肺成纖維細胞(HELF)週期改變中的作用.方法用AP-1熒光素酶報告基因技術檢測AP-1熒光素酶活力,流式細胞術測定細胞週期時相分佈,免疫印跡法檢測MAPK[包括細胞外調節蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末耑激酶(JNK)和p38激酶]總量及燐痠化水平,用MAPK顯性失活突變體(DN)(DN-ERK2、DN-JNK1和DN-p38)證明通路的上下遊關繫.結果 2μmol/L B(a)P分彆處理細胞0、6、12、24 h,AP-1活力在12 h達峰值,是對照組的2.22倍,差異有統計學意義(P＜0.05);ERK1/2、JNK1/2和p38蛋白激酶的燐痠化水平明顯提高,分彆是對照組的2.5、14.0和2.1倍;B(a)P處理組S期細胞比例(50.2%±4.6%)與對照組(16.7%±8.1%)相比明顯增加,差異有統計學意義(P＜0.01);ERK2和JNK1顯性失活突變體的過錶達均可明顯降低B(a)P誘導的AP-1活力增彊,併且明顯降低B(a)P處理組S期細胞比例(分彆為33.3%±1.7%,30.8%±3.9%),差異均有統計學意義(P＜0.05);p38顯性失活突變體的過錶達對B(a)P引起的AP-1活力增彊及S期細胞比例增加無影響.AP-1化學抑製劑薑黃素(20μmol/L)可明顯降低B(a)P引起的S期細胞比例增加(13.6%±2.9%),差異均有統計學意義(P＜0.05).結論 ERK和JNK通過活化AP-1介導B(a)P誘導的細胞週期改變;而B(a)P誘導的AP-1活力增彊及細胞週期改變與p38無關.
목적탐토사렬원활화단백격매(MAPK)/전록인자활화단백-1(AP-1)신호통로재조공분병(a)비[B(a)P]치인배폐성섬유세포(HELF)주기개변중적작용.방법용AP-1형광소매보고기인기술검측AP-1형광소매활력,류식세포술측정세포주기시상분포,면역인적법검측MAPK[포괄세포외조절단백격매(ERK)、c-Jun안기말단격매(JNK)화p38격매]총량급린산화수평,용MAPK현성실활돌변체(DN)(DN-ERK2、DN-JNK1화DN-p38)증명통로적상하유관계.결과 2μmol/L B(a)P분별처리세포0、6、12、24 h,AP-1활력재12 h체봉치,시대조조적2.22배,차이유통계학의의(P＜0.05);ERK1/2、JNK1/2화p38단백격매적린산화수평명현제고,분별시대조조적2.5、14.0화2.1배;B(a)P처리조S기세포비례(50.2%±4.6%)여대조조(16.7%±8.1%)상비명현증가,차이유통계학의의(P＜0.01);ERK2화JNK1현성실활돌변체적과표체균가명현강저B(a)P유도적AP-1활력증강,병차명현강저B(a)P처리조S기세포비례(분별위33.3%±1.7%,30.8%±3.9%),차이균유통계학의의(P＜0.05);p38현성실활돌변체적과표체대B(a)P인기적AP-1활력증강급S기세포비례증가무영향.AP-1화학억제제강황소(20μmol/L)가명현강저B(a)P인기적S기세포비례증가(13.6%±2.9%),차이균유통계학의의(P＜0.05).결론 ERK화JNK통과활화AP-1개도B(a)P유도적세포주기개변;이B(a)P유도적AP-1활력증강급세포주기개변여p38무관.
