中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2002年
2期
122-130
,共9页
仇润祥%朱兴国%刘丽%唐国敏
仇潤祥%硃興國%劉麗%唐國敏
구윤상%주흥국%류려%당국민
黑曲霉糖化酶%电泳迁移率变动分析%蛋白结合因子%DNaseⅠ足印分析
黑麯黴糖化酶%電泳遷移率變動分析%蛋白結閤因子%DNaseⅠ足印分析
흑곡매당화매%전영천이솔변동분석%단백결합인자%DNaseⅠ족인분석
以糖化酶生产菌株黑曲霉T21(Aspergillus niger T21)的糖化酶基因(glaA)5′cis调控区片段为探针, 采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法, 从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与 glaA 5′调控区特异结合的蛋白因子, 并把其结合DNA 定位在T21 glaA 5′调控区的 -374～-344,-484 ～-414以及-580～-540 bp 3个区段, 且此3个结合DNA的片段在EMSA实验中呈现交叉竞争, 表明这3个DNA区段可与同一个蛋白因子相结合. 以-374～-344 bp序列为探针的紫外交联实验表明, 该蛋白因子的分子量(或亚基分子量)约为10 ku. 利用DNaseⅠ足印分析确定了此蛋白因子在前两个区段的精细结合部位, 并对其结合序列的特性进行了分析.
以糖化酶生產菌株黑麯黴T21(Aspergillus niger T21)的糖化酶基因(glaA)5′cis調控區片段為探針, 採用電泳遷移率變動分析(EMSA)法, 從黑麯黴蛋白粗提液中檢測到與 glaA 5′調控區特異結閤的蛋白因子, 併把其結閤DNA 定位在T21 glaA 5′調控區的 -374～-344,-484 ～-414以及-580～-540 bp 3箇區段, 且此3箇結閤DNA的片段在EMSA實驗中呈現交扠競爭, 錶明這3箇DNA區段可與同一箇蛋白因子相結閤. 以-374～-344 bp序列為探針的紫外交聯實驗錶明, 該蛋白因子的分子量(或亞基分子量)約為10 ku. 利用DNaseⅠ足印分析確定瞭此蛋白因子在前兩箇區段的精細結閤部位, 併對其結閤序列的特性進行瞭分析.
이당화매생산균주흑곡매T21(Aspergillus niger T21)적당화매기인(glaA)5′cis조공구편단위탐침, 채용전영천이솔변동분석(EMSA)법, 종흑곡매단백조제액중검측도여 glaA 5′조공구특이결합적단백인자, 병파기결합DNA 정위재T21 glaA 5′조공구적 -374～-344,-484 ～-414이급-580～-540 bp 3개구단, 차차3개결합DNA적편단재EMSA실험중정현교차경쟁, 표명저3개DNA구단가여동일개단백인자상결합. 이-374～-344 bp서렬위탐침적자외교련실험표명, 해단백인자적분자량(혹아기분자량)약위10 ku. 이용DNaseⅠ족인분석학정료차단백인자재전량개구단적정세결합부위, 병대기결합서렬적특성진행료분석.
