生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
5期
725-730
,共6页
赵武%肖少波%方六荣%江云波%宋云峰%严琳%余晓岚%陈焕春
趙武%肖少波%方六榮%江雲波%宋雲峰%嚴琳%餘曉嵐%陳煥春
조무%초소파%방륙영%강운파%송운봉%엄림%여효람%진환춘
牛疱疹病毒1型VP22%猪繁殖与呼吸综合征病毒%ORF5M基因%蛋白转导%DNA疫苗
牛皰疹病毒1型VP22%豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%ORF5M基因%蛋白轉導%DNA疫苗
우포진병독1형VP22%저번식여호흡종합정병독%ORF5M기인%단백전도%DNA역묘
为了提高表达GP5的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗的免疫效应,将具有蛋白转导功能的牛疱疹病毒1型(BHV-1)VP22基因插入到经过修饰具有更好免疫原性的PRRSV修饰型ORF5基因(ORF5M)上游,构建VP22和ORF5M融合表达的真核表达质粒pCI-VP22-ORF5M.经间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot检测证实体外表达后,免疫BALB/c小鼠,检测小鼠免疫后的GP5特异性ELISA抗体、抗PRRSV中和抗体和脾淋巴细胞增殖反应,并与非融合的真核表达质粒pCI-ORF5M进行比较.结果显示,融合表达VP22-GP5的DNA疫苗pCI-VP22-ORF5M诱导的体液免疫和细胞免疫反应均明显高于非融合表达的DNA疫苗pCI-ORF5M,表明蛋白转导相关蛋白BHV-1 VP22能显著增强表达GP5的PRRSV DNA疫苗的免疫效应,有效发挥了基因免疫佐剂效应;这为研制PRRSV高效DNA疫苗奠定了基础,同时也为其它疾病的高效新型疫苗研究提供了思路.
為瞭提高錶達GP5的豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)DNA疫苗的免疫效應,將具有蛋白轉導功能的牛皰疹病毒1型(BHV-1)VP22基因插入到經過脩飾具有更好免疫原性的PRRSV脩飾型ORF5基因(ORF5M)上遊,構建VP22和ORF5M融閤錶達的真覈錶達質粒pCI-VP22-ORF5M.經間接免疫熒光試驗(IFA)和Western-blot檢測證實體外錶達後,免疫BALB/c小鼠,檢測小鼠免疫後的GP5特異性ELISA抗體、抗PRRSV中和抗體和脾淋巴細胞增殖反應,併與非融閤的真覈錶達質粒pCI-ORF5M進行比較.結果顯示,融閤錶達VP22-GP5的DNA疫苗pCI-VP22-ORF5M誘導的體液免疫和細胞免疫反應均明顯高于非融閤錶達的DNA疫苗pCI-ORF5M,錶明蛋白轉導相關蛋白BHV-1 VP22能顯著增彊錶達GP5的PRRSV DNA疫苗的免疫效應,有效髮揮瞭基因免疫佐劑效應;這為研製PRRSV高效DNA疫苗奠定瞭基礎,同時也為其它疾病的高效新型疫苗研究提供瞭思路.
위료제고표체GP5적저번식여호흡종합정병독(PRRSV)DNA역묘적면역효응,장구유단백전도공능적우포진병독1형(BHV-1)VP22기인삽입도경과수식구유경호면역원성적PRRSV수식형ORF5기인(ORF5M)상유,구건VP22화ORF5M융합표체적진핵표체질립pCI-VP22-ORF5M.경간접면역형광시험(IFA)화Western-blot검측증실체외표체후,면역BALB/c소서,검측소서면역후적GP5특이성ELISA항체、항PRRSV중화항체화비림파세포증식반응,병여비융합적진핵표체질립pCI-ORF5M진행비교.결과현시,융합표체VP22-GP5적DNA역묘pCI-VP22-ORF5M유도적체액면역화세포면역반응균명현고우비융합표체적DNA역묘pCI-ORF5M,표명단백전도상관단백BHV-1 VP22능현저증강표체GP5적PRRSV DNA역묘적면역효응,유효발휘료기인면역좌제효응;저위연제PRRSV고효DNA역묘전정료기출,동시야위기타질병적고효신형역묘연구제공료사로.
