中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
4期
299-302
,共4页
邢继兰%潘洁%陈波%饶忠%尤永进%徐泉兴%刘惠莉
邢繼蘭%潘潔%陳波%饒忠%尤永進%徐泉興%劉惠莉
형계란%반길%진파%요충%우영진%서천흥%류혜리
口蹄疫病毒%结构蛋白%vp1基因表达
口蹄疫病毒%結構蛋白%vp1基因錶達
구제역병독%결구단백%vp1기인표체
体外克隆口蹄疫病毒vp1基因,构建重组表达载体pET28a-vp1.将此重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,进行诱导表达,SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表明,诱导5 h后表达量达到最高,表达产物大小约为33 Ku～40 Ku,表达蛋白能与口蹄疫病毒阳性血清产生特异性免疫反应.经HPLC纯化后,以重组蛋白为抗原,建立检测VP1蛋白抗体的ELISA方法,检测猪牛血清样品,免疫抗体检测结果与口蹄疫液相阻断ELISA检测结果呈正相关,能反映出免疫抗体动态变化,对临床样品口蹄疫病毒血清抗体检测,两种方法有一定相关性,但不显著.所以以重组VP1蛋白为检测抗原的ELISA方法有望用于口蹄疫免疫抗体监测.
體外剋隆口蹄疫病毒vp1基因,構建重組錶達載體pET28a-vp1.將此重組質粒轉化到受體菌BL21(DE3)中,進行誘導錶達,SDS-PAGE和蛋白質印跡分析錶明,誘導5 h後錶達量達到最高,錶達產物大小約為33 Ku～40 Ku,錶達蛋白能與口蹄疫病毒暘性血清產生特異性免疫反應.經HPLC純化後,以重組蛋白為抗原,建立檢測VP1蛋白抗體的ELISA方法,檢測豬牛血清樣品,免疫抗體檢測結果與口蹄疫液相阻斷ELISA檢測結果呈正相關,能反映齣免疫抗體動態變化,對臨床樣品口蹄疫病毒血清抗體檢測,兩種方法有一定相關性,但不顯著.所以以重組VP1蛋白為檢測抗原的ELISA方法有望用于口蹄疫免疫抗體鑑測.
체외극륭구제역병독vp1기인,구건중조표체재체pET28a-vp1.장차중조질립전화도수체균BL21(DE3)중,진행유도표체,SDS-PAGE화단백질인적분석표명,유도5 h후표체량체도최고,표체산물대소약위33 Ku～40 Ku,표체단백능여구제역병독양성혈청산생특이성면역반응.경HPLC순화후,이중조단백위항원,건립검측VP1단백항체적ELISA방법,검측저우혈청양품,면역항체검측결과여구제역액상조단ELISA검측결과정정상관,능반영출면역항체동태변화,대림상양품구제역병독혈청항체검측,량충방법유일정상관성,단불현저.소이이중조VP1단백위검측항원적ELISA방법유망용우구제역면역항체감측.
