徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2009年
4期
226-229
,共4页
间充质干细胞%骨髓%贴壁法分离培养
間充質榦細胞%骨髓%貼壁法分離培養
간충질간세포%골수%첩벽법분리배양
目的 建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞(MSC) 的方法,研究MSC的生物学特性.方法 贴壁培养法分离纯化大鼠MSC,体外培养和连续传代, 在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化;利用四唑盐比色(MTT)法测定MSC的生长曲线;流式细胞仪(FCM)鉴定MSC膜抗原.结果 原代分离的MSC在接种后48 h贴壁,细胞形态为椭圆形、多角形及短梭形,12天时细胞呈长梭形并达到90%单层融合.经传代扩增,细胞进一步纯化.细胞传代后2天内处于潜伏期, 3天后进入生长期,7天后进入平台期.FCM检测CD45、CD90阳性率分别为19.60%、95.38%.结论 贴壁培养法能有效分离纯化大鼠MSC,用此方法培养的细胞生长稳定,增殖能力活跃,具有MSC的一般生物学特性,为其成为组织工程理想的种子细胞提供了进一步的支持.
目的 建立一種簡便有效的體外分離純化及培養擴增大鼠骨髓間充質榦細胞(MSC) 的方法,研究MSC的生物學特性.方法 貼壁培養法分離純化大鼠MSC,體外培養和連續傳代, 在倒置顯微鏡下連續觀察細胞的形態變化;利用四唑鹽比色(MTT)法測定MSC的生長麯線;流式細胞儀(FCM)鑒定MSC膜抗原.結果 原代分離的MSC在接種後48 h貼壁,細胞形態為橢圓形、多角形及短梭形,12天時細胞呈長梭形併達到90%單層融閤.經傳代擴增,細胞進一步純化.細胞傳代後2天內處于潛伏期, 3天後進入生長期,7天後進入平檯期.FCM檢測CD45、CD90暘性率分彆為19.60%、95.38%.結論 貼壁培養法能有效分離純化大鼠MSC,用此方法培養的細胞生長穩定,增殖能力活躍,具有MSC的一般生物學特性,為其成為組織工程理想的種子細胞提供瞭進一步的支持.
목적 건립일충간편유효적체외분리순화급배양확증대서골수간충질간세포(MSC) 적방법,연구MSC적생물학특성.방법 첩벽배양법분리순화대서MSC,체외배양화련속전대, 재도치현미경하련속관찰세포적형태변화;이용사서염비색(MTT)법측정MSC적생장곡선;류식세포의(FCM)감정MSC막항원.결과 원대분리적MSC재접충후48 h첩벽,세포형태위타원형、다각형급단사형,12천시세포정장사형병체도90%단층융합.경전대확증,세포진일보순화.세포전대후2천내처우잠복기, 3천후진입생장기,7천후진입평태기.FCM검측CD45、CD90양성솔분별위19.60%、95.38%.결론 첩벽배양법능유효분리순화대서MSC,용차방법배양적세포생장은정,증식능력활약,구유MSC적일반생물학특성,위기성위조직공정이상적충자세포제공료진일보적지지.