南京林业大学学报（自然科学版）
南京林業大學學報（自然科學版）
남경임업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NANJING FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2009年
4期
33-37
,共5页
水仙%胚性愈伤%农杆菌介导法%遗传转化%GUS基因
水仙%胚性愈傷%農桿菌介導法%遺傳轉化%GUS基因
수선%배성유상%농간균개도법%유전전화%GUS기인
用正交实验设计对前期影响水仙胚性愈伤诱导和分化关联性大的因素进行综合分析,结果显示,培养基类型、激素及处理方式、不同添加物等对水仙外植体胚性愈伤诱导及分化的影响是基于培养基的多因素协同效应.水仙适宜胚性愈伤诱导培养基是:改良MB+NAA(0.2 mg/L)+6-BA(2 mg/L)+ABA (2 mg/L)+AgNO3(5 mg/L);适宜的分化培养基是:改良N6+2,4D(0.5 mg/L)+6-BA(2.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+ABA(2 mg/L).实验中观察到水仙体细胞胚的发生,在胚性愈伤诱导和分化体系优化基础上实现农杆菌介导GUS基因转化,稳定表达抗性愈伤GUS染色显示最佳胚性愈伤诱导培养基能促进水仙外植体感受态的形成,有利于外源基因的接受,PCR检测表明实验中获得3株转GUS基因阳性植株.
用正交實驗設計對前期影響水仙胚性愈傷誘導和分化關聯性大的因素進行綜閤分析,結果顯示,培養基類型、激素及處理方式、不同添加物等對水仙外植體胚性愈傷誘導及分化的影響是基于培養基的多因素協同效應.水仙適宜胚性愈傷誘導培養基是:改良MB+NAA(0.2 mg/L)+6-BA(2 mg/L)+ABA (2 mg/L)+AgNO3(5 mg/L);適宜的分化培養基是:改良N6+2,4D(0.5 mg/L)+6-BA(2.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+ABA(2 mg/L).實驗中觀察到水仙體細胞胚的髮生,在胚性愈傷誘導和分化體繫優化基礎上實現農桿菌介導GUS基因轉化,穩定錶達抗性愈傷GUS染色顯示最佳胚性愈傷誘導培養基能促進水仙外植體感受態的形成,有利于外源基因的接受,PCR檢測錶明實驗中穫得3株轉GUS基因暘性植株.
용정교실험설계대전기영향수선배성유상유도화분화관련성대적인소진행종합분석,결과현시,배양기류형、격소급처리방식、불동첨가물등대수선외식체배성유상유도급분화적영향시기우배양기적다인소협동효응.수선괄의배성유상유도배양기시:개량MB+NAA(0.2 mg/L)+6-BA(2 mg/L)+ABA (2 mg/L)+AgNO3(5 mg/L);괄의적분화배양기시:개량N6+2,4D(0.5 mg/L)+6-BA(2.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+ABA(2 mg/L).실험중관찰도수선체세포배적발생,재배성유상유도화분화체계우화기출상실현농간균개도GUS기인전화,은정표체항성유상GUS염색현시최가배성유상유도배양기능촉진수선외식체감수태적형성,유리우외원기인적접수,PCR검측표명실험중획득3주전GUS기인양성식주.
