医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2009年
5期
424-427
,共4页
谢军平%罗文娟%李晓%熊亮%侯晓华%陶晓南
謝軍平%囉文娟%李曉%熊亮%侯曉華%陶曉南
사군평%라문연%리효%웅량%후효화%도효남
树突状细胞%粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子%白介素-4%肿瘤坏死因子-α%脂多糖
樹突狀細胞%粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子%白介素-4%腫瘤壞死因子-α%脂多糖
수돌상세포%립세포-거서세포집락자격인자%백개소-4%종류배사인자-α%지다당
目的 探讨最佳体外诱导培养小鼠成熟树突状细胞(dendritic cells,DC)的方法.方法 分离、纯化6周龄C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,以含10 %胎牛血清、20 ng/ml重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和10 ng/ml重组小鼠白细胞介素-4(IL-4)的RPM I-1640培养基培养7 d,然后将细胞分成对照未刺激组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激组和TNF-α+脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激组.继续培养48 h后,观察各组细胞形态,检测IL-12、IL-6浓度及细胞表面标志CD11c、CD80、CD86 和MHC Ⅱ.结果 培养9 d后,两刺激组培养的细胞经相差显微镜观察有DC生长.TNF-α刺激组细胞培养上清液中IL-6、IL-12含量显著高于对照组(P＜0.01),但显著低于TNF-α+LPS刺激组(P＜0.05).3组均高表达CD11c,各组间无显著差异;而CD80、CD86和MHCⅡ表达阳性率TNF-α刺激组显著高于对照组(P＜0.01),TNF-α+LPS刺激组显著高于单纯TNF-α刺激组(P＜0.05).结论 联合使用TNF-α与LPS刺激可使DC成熟度提高,分泌IL-6、IL-12增加.
目的 探討最佳體外誘導培養小鼠成熟樹突狀細胞(dendritic cells,DC)的方法.方法 分離、純化6週齡C57BL/6小鼠骨髓單覈細胞,以含10 %胎牛血清、20 ng/ml重組小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和10 ng/ml重組小鼠白細胞介素-4(IL-4)的RPM I-1640培養基培養7 d,然後將細胞分成對照未刺激組、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)刺激組和TNF-α+脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激組.繼續培養48 h後,觀察各組細胞形態,檢測IL-12、IL-6濃度及細胞錶麵標誌CD11c、CD80、CD86 和MHC Ⅱ.結果 培養9 d後,兩刺激組培養的細胞經相差顯微鏡觀察有DC生長.TNF-α刺激組細胞培養上清液中IL-6、IL-12含量顯著高于對照組(P＜0.01),但顯著低于TNF-α+LPS刺激組(P＜0.05).3組均高錶達CD11c,各組間無顯著差異;而CD80、CD86和MHCⅡ錶達暘性率TNF-α刺激組顯著高于對照組(P＜0.01),TNF-α+LPS刺激組顯著高于單純TNF-α刺激組(P＜0.05).結論 聯閤使用TNF-α與LPS刺激可使DC成熟度提高,分泌IL-6、IL-12增加.
목적 탐토최가체외유도배양소서성숙수돌상세포(dendritic cells,DC)적방법.방법 분리、순화6주령C57BL/6소서골수단핵세포,이함10 %태우혈청、20 ng/ml중조소서립세포-거서세포집락자격인자(GM-CSF)화10 ng/ml중조소서백세포개소-4(IL-4)적RPM I-1640배양기배양7 d,연후장세포분성대조미자격조、종류배사인자-α(TNF-α)자격조화TNF-α+지다당(lipopolysaccharides,LPS)자격조.계속배양48 h후,관찰각조세포형태,검측IL-12、IL-6농도급세포표면표지CD11c、CD80、CD86 화MHC Ⅱ.결과 배양9 d후,량자격조배양적세포경상차현미경관찰유DC생장.TNF-α자격조세포배양상청액중IL-6、IL-12함량현저고우대조조(P＜0.01),단현저저우TNF-α+LPS자격조(P＜0.05).3조균고표체CD11c,각조간무현저차이;이CD80、CD86화MHCⅡ표체양성솔TNF-α자격조현저고우대조조(P＜0.01),TNF-α+LPS자격조현저고우단순TNF-α자격조(P＜0.05).결론 연합사용TNF-α여LPS자격가사DC성숙도제고,분비IL-6、IL-12증가.
