中南林业科技大学学报
中南林業科技大學學報
중남임업과기대학학보
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY OF FORESTRY & TECHNOLOGY
2011年
3期
156-159
,共4页
安静%徐刚标%申响保%谷振军%张玉梅%储秀云
安靜%徐剛標%申響保%穀振軍%張玉梅%儲秀雲
안정%서강표%신향보%곡진군%장옥매%저수운
杉木%ISSR-PCR%正交优化
杉木%ISSR-PCR%正交優化
삼목%ISSR-PCR%정교우화
利用正交设计实验对影响杉木ISSR-PCR扩增的重要因素(Mg2+、dNTP、模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶)进行优化,以建立杉木ISSR-PCR反应的最佳体系.结果发现杉木ISSR-PCR最佳反应体系(20μL)为:MgCl2 1.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.7 μmol/L,模板DNA 90ng,TaqDNA聚合酶1 U;退火温度为52～55℃.扩增反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52℃退火40 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸7 min;4℃保存.该反应体系的建立,为杉木种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法.
利用正交設計實驗對影響杉木ISSR-PCR擴增的重要因素(Mg2+、dNTP、模闆DNA、引物、TaqDNA聚閤酶)進行優化,以建立杉木ISSR-PCR反應的最佳體繫.結果髮現杉木ISSR-PCR最佳反應體繫(20μL)為:MgCl2 1.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.7 μmol/L,模闆DNA 90ng,TaqDNA聚閤酶1 U;退火溫度為52～55℃.擴增反應程序為:94℃預變性5 min;94℃變性30 s,52℃退火40 s,72℃延伸2 min,40箇循環;72℃延伸7 min;4℃保存.該反應體繫的建立,為杉木種質資源分類、遺傳多樣性分析提供瞭更客觀可靠的方法.
이용정교설계실험대영향삼목ISSR-PCR확증적중요인소(Mg2+、dNTP、모판DNA、인물、TaqDNA취합매)진행우화,이건립삼목ISSR-PCR반응적최가체계.결과발현삼목ISSR-PCR최가반응체계(20μL)위:MgCl2 1.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,인물0.7 μmol/L,모판DNA 90ng,TaqDNA취합매1 U;퇴화온도위52～55℃.확증반응정서위:94℃예변성5 min;94℃변성30 s,52℃퇴화40 s,72℃연신2 min,40개순배;72℃연신7 min;4℃보존.해반응체계적건립,위삼목충질자원분류、유전다양성분석제공료경객관가고적방법.
