中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
4期
109-112
,共4页
郑秀红%甄立%邢莹%薛书江%贾立军%张守发
鄭秀紅%甄立%邢瑩%薛書江%賈立軍%張守髮
정수홍%견립%형형%설서강%가립군%장수발
牛附红细胞体%16S%rRNA基因%环介导等温扩增技术
牛附紅細胞體%16S%rRNA基因%環介導等溫擴增技術
우부홍세포체%16S%rRNA기인%배개도등온확증기술
为建立一种快捷、灵敏的牛附红细胞体检测方法,本研究根据GenBank上发表的16S rRNA基因(登录号:AF016546)序列设计合成2对LAMP特异引物,建立了检测牛附红细胞体环介导等温扩增(LAMP)方法,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验.LAMP扩增产物经电泳、显色鉴定.结果显示,LAMP方法扩增牛附红细胞体产物呈特征性梯状条带.显色反应呈现绿色荧光;敏感性检测最低浓度为25.6 fg/μL;特异性试验结果显示,牛附红细胞体检测管显色后呈阳性,而猪附红细胞体、牛新孢子虫、弓形虫及牛瑟氏泰勒虫等对照组均呈阴性,说明本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛附红细胞体的检测.
為建立一種快捷、靈敏的牛附紅細胞體檢測方法,本研究根據GenBank上髮錶的16S rRNA基因(登錄號:AF016546)序列設計閤成2對LAMP特異引物,建立瞭檢測牛附紅細胞體環介導等溫擴增(LAMP)方法,併優化瞭LAMP的各反應條件,進行瞭敏感性和特異性試驗.LAMP擴增產物經電泳、顯色鑒定.結果顯示,LAMP方法擴增牛附紅細胞體產物呈特徵性梯狀條帶.顯色反應呈現綠色熒光;敏感性檢測最低濃度為25.6 fg/μL;特異性試驗結果顯示,牛附紅細胞體檢測管顯色後呈暘性,而豬附紅細胞體、牛新孢子蟲、弓形蟲及牛瑟氏泰勒蟲等對照組均呈陰性,說明本研究建立的LAMP方法具有靈敏、特異、快速等優點,適閤于牛附紅細胞體的檢測.
위건립일충쾌첩、령민적우부홍세포체검측방법,본연구근거GenBank상발표적16S rRNA기인(등록호:AF016546)서렬설계합성2대LAMP특이인물,건립료검측우부홍세포체배개도등온확증(LAMP)방법,병우화료LAMP적각반응조건,진행료민감성화특이성시험.LAMP확증산물경전영、현색감정.결과현시,LAMP방법확증우부홍세포체산물정특정성제상조대.현색반응정현록색형광;민감성검측최저농도위25.6 fg/μL;특이성시험결과현시,우부홍세포체검측관현색후정양성,이저부홍세포체、우신포자충、궁형충급우슬씨태륵충등대조조균정음성,설명본연구건립적LAMP방법구유령민、특이、쾌속등우점,괄합우우부홍세포체적검측.
